粥状硬化の発生機構における内皮細胞形態と機能変化のメカニズムの研究

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570204
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 三俣 昌子 日本大学, 医学部, 教授 (40064589)
• 研究分担者: 岩佐 敏 山梨大学, 医学部, 講師 (40328745) ; 楠美 嘉晃 日本大学, 医学部, 講師 (60186393)
• キーワード: 粥状硬化 / 内皮細胞 / ずり応力 / アポトーシス / 細胞増殖 / IAP / 血管内皮面立体画像

研究概要

研究実施計画書に従い実験を行い以下の成果を得た。
1.ヒトおよび実験動物の粥状硬化巣および血管分岐部領域における内皮遺伝子・蛋白発現の立体画像作成:われわれはラット胸大動脈を免疫染色後、コンピュウター連動超深度顕微鏡を用いて血管内腔面全体を覆う内皮細胞(内皮)の立体画像を作成して、特定の蛋白を発現する内皮の分布地図を作成する方法を開発した。その結果、増殖内皮は非分岐部に比し分岐部が多いいが、糖尿病性動脈硬化促進因子であるAGE-BSAを腹腔内注入すると分岐部はもとより非分岐部でも明らかに増加することが解った.今年度はこの研究を更に発展して、SDラットと共に2型糖尿病モデルラット(OLETF)における増殖内皮の分布、内皮に接着したED-1抗原陽性マクロファージの分布を検討し以下の結果を得た。
(1)増殖内皮の数はOLETFおよび対照のLETO共に加齢に伴って増加し、非分岐部に比べ分岐部で多く、OLETFは対照に比し多い傾向を示したが有意差はなかった。(2)内皮に接着したマクロファージの数はSD・OLETF・LETO全てにおいて、非分岐部に比し分岐部で多く、加齢と共に増加し、OLETFは対照より有意に多く、SDではAGE-BSAまたはgulucose1回投与で増加した。以上の結果はマクロファージの内皮への接着は、乱流、加齢、耐糖能、遣伝子多型、gulucoseまたはAGE-BSA投与により左右されることを示唆する。
2.ずり応力による内皮のアポトーシス抑制と増殖抑制のクロストーク:Smac遺伝子を内皮に導入してIAP活性を阻害したところ、ずり応力によるcaspase 3活性抑制が阻止されたので、本年度は、内皮の細胞質とミトコンドリア分画を分けて、ミトコンドリアからのSmac放出がずり応力により阻止されるか否かを検討したが有意差をつかめなかった。実験方法の改良が必要である。

研究成果

• [文献書誌] Jin X: "Induction of human inhibitor of apoptosis protein-2 by shear stress in endothelial cells."FEBS Letters. 5292. 286-292 (2002)
• [文献書誌] Yamada T: "Effects of Lentinus mycelia on dietry-induced atherosclerotic invlvement in rabbit aorta."Journal of Artherosclerosis and Thrombosis. 9(3). 149-156 (2002)
• [文献書誌] Sakai T: "Bone marrow chimerism prevents atherosclerosis in arterial walls of mice deficient in apolipoprotein E."Atherosclerosis. 161. 27-34 (2002)
• [文献書誌] Jin X: "Effect of an elastase inhibitor on atherogenesis."Nihon Univ.J.of Med.. 45. 77-86 (2003)
• [文献書誌] Jin X: "Shear stress-induced collagen XII expression is associated with atherogenesis."Biochemical Biophysical Research Communications. 308(1). 152-158 (2003)
• [文献書誌] Azuma K: "A new en face method is useful to quantitate endothelial damage in vivo."Biochemical Biophysical Research Communications. 309. 384-390 (2003)
• [文献書誌] 山田 勉: "高齢者動脈硬化症の退縮に関する研究(4) 中心陥凹を呈する動脈硬化性病変とperoxisome proliferator-activated receptors(PPARs)発現についての検討"老年医学. (2003)
• [文献書誌] 三俣 昌子: "血管新生再生治療の病理"日大医学雑誌. 62(7). 363-365 (2003)
• [文献書誌] Iwasa S: "Increased expression of seprase, a membrane-type serine protease, is associated with lymph node metastasis in human colorectal cancer."Cancer Lett.. 10;199(1). 91-98 (2003)
• [文献書誌] Jin X: "Expression patterns of seprase, a membrane serine protease, in cervical carcinoma and cervical intraepithelial neoplasm."Anticancer Res.. 23(4). 3195-3198 (2003)
• [文献書誌] Okada K: "Seprase, a membrane-type serine protease, has different expression patterns in intestinal- and diffuse-type gastric cancer."Oncogene.. 65. 363-370 (2003)