新型ヒトマラリア原虫の遺伝子解析と人工培養の試み

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570213
• 研究機関: 大分大学(医学部)
• 研究代表者: 川本 文彦 大分大学, 医学部・総合科学研究支援センター, 教授 (40115556)
• キーワード: 新型ヒトマラリア原虫 / 新型卵形マラリア原虫 / 遺伝子解析 / SSUrRNA / システインプロテアーゼ / オーキネート表面抗原 / チトクロームb / 人工培養

研究概要

新型ヒトマラリア原虫の内、ミャンマーおよびインドネシアのマラリア野外調査で得られた新型卵形マラリア原虫の野性株を用いて、ミトコンドリア・チトクロームb、システインプロテアーゼ、オーキネート表面抗原遺伝子などの遺伝子解析を行い、従来型の遺伝子配列と比較検討した。また、得られた野性株を用いて、人工培養を試みた。
1)SSUrRNA遺伝子を解析し、従来型と新型の両者を比較した結果、明らかに両者は異なっていた。従来型はこれまでに報告されている卵形マラリアの標準株とされているNigerian-1株の遺伝子配列と極めて類似していた。
2)システインプロテアーゼ遺伝子では、Nigerian-1株と比較した結果、新型卵形マラリア原虫では19塩基(3.6%)の差異と8つのアミノ酸置換が認められた。
3)オーキネート表面抗原遺伝子も従来型のNigerian-I株と比較した結果、従来型の遺伝子とは全く異なっていた。
4)チトクロームb遺伝子では、従来型と新型では12bpの差異と1アミノ酸置換が認められた。Nigerian-I株について報告されていないため、Harding株と比較した結果、合計15塩基(1.4%)が異なっており、アミノ酸置換は2ヶ所に認められた。三日熱マラリア原虫、四日熱マラリア原虫、熱帯熱マラリア原虫とも異なっており、明らかに卵形マラリア原虫に属するが、従来型とも異なっていることが判明した。
5)新型卵形マラリア原虫を、通常用いられているRPMI-1640培地にグルコースおよび20%ヒト血清を添加した特殊培地を用いて、キャンドルジャー法による人工培養を試みた。培養後24時間で幼弱栄養期からシゾント期に発育したが、シゾントは成熟過程で異常形態を示し、新しいメロゾイトの形成は認められなかった。

研究成果

• [文献書誌] Safitri, I.et al.: "Sequence diversity in the amino-terminal region of the malaria-vaccine candidate serine repeat antigen (SERA) in natural Plasmodium falciparum populations"Parasitol.Int.. 52・2. 117-131 (2003)
• [文献書誌] Tantular, I.S.et al.: "Synergistic enhancement of a copper chelator, bathocuproine disulphonate, and cysteine on in vitro growth of Plasmodium falciparum"SEA.J.Trop.Med.Pub.Health. 34・2. 301-309 (2003)
• [文献書誌] Tantular, I.S., Kawamoto, F.: "An improved, simple screening method for detection of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency"Trop.Med.Int.Health. 8・6. 569-574 (2003)
• [文献書誌] Matsuoka, H.et al.: "Five different glucose-6-phophate dehydrogenase (G6PD) variants found among 11 G6PD-deficient persons"J.Human Genet.. 48・10. 541-544 (2003)
• [文献書誌] Jalloh, A.et al.: "Rapid epidemiologic assessment of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency in malaria-endemic areas in Southeast Asia using a novel diagnostic kit"Trop.Med.h1t.Health. (印刷中).
• [文献書誌] win, T.T.et al.: "Sequence analysis of nuclear and mitochondrial genes of the human malaria parasite Plasmodium ovale supports its division into at least two variants"Emerg.Inf.Dis.. (印刷中).