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1.Plasmodium berghei XAT感染に対して強い防御効果を示す原虫抗原特異的モノクローナル抗体を用いて、その標的抗原であるマラリア防御抗原について検討した。
2.P.berghei XATの感染防御抗原であるB1D6抗原が感染のどの時期に出現するかを明らかにするために、B1D6抗体を用いたtwo-sited assay systemを構築した。H6G11抗体の標的抗原がB1D6抗体の標的抗原と同一であることが明らかとなったので、より感度の高いアッセイ系を確立するために各々の抗体を精製後ピオチン標識し、1抗体法と2抗体法を比較検討した。その結果、2抗体法により血中のマラリア抗原を検出し得た。
3.宿主の遺伝的背景の相違により、B1D6抗体による.P.berghei XATマラリアに対する防御効果に差が認められるかどうか調べた。その結果、BALB/cマウスでは第2ピークの%parasitemiaが100倍〜1000倍抑制されたが、C57BL6マウスでは10倍〜50倍の抑制にとどまった。
4.アフィニティーカラムによって得た精製抗原を電気泳動した後に主要バンドを切り出し、防御抗原由来ペプチドをLC-MS/MS解析した。その後、de novo sequencingにより防御抗原ペプチドのアミノ酸の推定配列を得た。この配列についてPlasmoDBとNCBInrに対して検索したところ、このマウスマラリア原虫の防御抗原に含まれるアミノ酸配列と高い相同性を有する配列が、熱帯熱マラリア原虫(3D7株)のhypothetical protein内に存在することを見出した(この配列の高い相同性は、現在のところ、データベース中の他の生物には認められていない)。
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