ヒトNKT細胞前駆細胞の解析と体外増殖法の開発

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570291
• 研究機関: 国立がんセンター(研究所)
• 研究代表者: 若杉 尋 国立がんセンター, 研究所・薬効試験部, 部長 (10112632)
• 研究分担者: 五十嵐 美徳 国立がんセンター, 研究所・薬効試験部, 研究員 (70280782)
• キーワード: ヒトNKT細胞 / ヒトVα24陽性NKT細胞 / 対外増殖法 / G-CSF / 自己血漿 / IFN-γ / IL-4 / CD1d非拘束性

研究概要

1.ヒトVα24陽性NKT細胞の体外増殖培養液を、10%FBS、10%リコンビナントヒト血清アルブミン、10%自己血漿、10%自己血清で比較したところ、10%自己血漿による培養が最も効率的であった。
2.全細胞数に占めるVα24陽性NKT細胞の割合を比較したところ、G-CSF投与前の末梢血では増殖比が約350倍であったのに比べ、G-CSF投与後の末梢血では増殖比が約1900倍であり、G-CSF投与による増殖能の改善が示された。
3.G-CSF投与前後の細胞と血漿をそれぞれ交叉組合せし培養したところ、「G-CSF投与後の細胞」に「G-CSF投与後の血漿」を添加した場合がVα24陽性NKT細胞の増殖比が最も高く、G-CSF投与後の細胞、および、血漿のいずれもがVα24陽性NKT細胞の増殖に関与していることが分かった。
4.G-CSF投与後末梢血由来のVα24陽性NKT細胞には、IL-3,IL-4,IL-7のレセプター発現が高まっていた。
5.G-CSF投与後の血漿中にはIL-3,IL-7,IL-13の産生が高まっていた。
6.培養後の細胞群には約20%のVα24陽性NKT細胞、CD4^+細胞、CD8^+細胞、次いで約10%のNK細胞が含まれ、B細胞、単球は殆ど含まれていないことが分かった。
7.G-CSF投与後の末梢血を用いて誘導したVα24陽性NKT細胞は、IFN-γ、および、IL-4の産生が高まっていた。また、Vα24陽性NKT細胞のサイトカイン産生は、IL-4よりもIFN-γ優位であった。
8.この培養系を用いて増殖したVα24陽性NKT細胞は、CD1d非拘束性に細胞障害性を示した。

研究成果

• [文献書誌] Rumiko Asada-Mikami, et al.: "Increased expansion of Vα24' T cells derived from G-CSF mobilized peripheral blood stem cells as compared to peripheral blood mononuclear cells following α-galactosylceramide stimulation."Cnacer Science. 94. 383-388 (2003)
• [文献書誌] Kazunori Kato, et al.: "U5A2-13, an antigen originally found on mouse NK-like T Cells, is an early inducible cell surface antigen during lymphoid activation."Cellular Immunology. 221. 27-36 (2003)
• [文献書誌] Hideyuki Ishida, et al.: "Determining the Levels of Matrix Metalloproteinase-9 in Portal and Peripheral Blood is Useful for Predicting Liver Metastasis of Colorectal Cancer."Jpn J Clin Oncol. 33. 186-191 (2003)
• [文献書誌] Mitsuzi Yoshida, et al.: "Involvement of PKC beta II in Anti-Proliferating Action of a New Antitumor Compound Gnidimacrin."Int.J.Cancer. 105. 601-606 (2003)
• [文献書誌] Kunihisa Nakai, et al.: "Anti-thymocyte globulin affects the occurrence of acute and chronic graft-versus-host disease after a reduced-intensity conditioning regimen by modulating mixed chimerism induction and immune reconstitution."Transplantation. 75. 2135-2143 (2003)
• [文献書誌] Sachie Matsuda, et al.: "Separation of Phospholipids and Glycolipids Using Analytical Toroidal-Coil Counter-Current Chromatography. α. Comparison of the Hydrophobicity Between Mycoplasma fermentans and Human-Brain Lipids."Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies. 26. 1135-1147 (2003)