新規結核ワクチン(DNA,rBCG,融合蛋白)作製と新しいキラーT細胞分化機構

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570294
• 研究機関: 独立行政法人 国立病院機構 近畿中央胸部疾患センター
• 研究代表者: 岡田 全司 国立療養所近畿中央病院, 臨床研究センター・結核研究部, 部長 (40160684)
• 研究分担者: 鈴木 克洋 国立療養所近畿中央病院臨床研究センター, 薬剤耐性結核・感染症研究部, 部長 (00206468) ; 吉田 栄人 自治医科大学, 医学部, 講師 (10296121) ; 大原 直也 長崎大学, 歯学部, 助教授 (70223930) ; 源 誠二郎 国立療養所近畿中央病院臨床研究センター, 薬剤耐性結核・感染症研究部, 薬剤耐性診断研究室長 (40212237) ; 井上 義一 国立療養所近畿中央病院臨床研究センター, 呼吸不全研究部, 部長 (90240895)
• キーワード: 結核ワクチン / キラーT細胞 / DNAワクチン / リコンビナントBCG / マクロファージ / granulysin / SCIDマウス / IL-6遺伝子

研究概要

1.結核菌症のキラーT細胞分化機構:(1)Granulysinによる結核の病態解明a)抗結核キラーT細胞から産出されるgranulysin〔15kdのgranulysin(15KGra)〕が結核殺傷に極めて重要な役割を果たしている発見をした。GraはMΦ内結核菌を殺し、GraDNAワクチンは結核予防効果を示した。さらに、Tgマウスを初めて作製し、生体内抗結核作用を明らかにした。(2)結核患者キラーT細胞から分泌されるkiller secretory protein (Ksp37)が血清中で低下していることを初めて明らかにした。
2.新しい結核予防ワクチンの開発(1)HSP65 DNA+IL-12 DNAウクチン、(2)リコンビナント72fBCG(r72fBCG)ワクチン、(3)72f fusion蛋白ワクチンの世界の最先端のワクチンを開発した。新しいDNAワクチンの(1)HVJ-liposome/HSP65 DNA+IL-12 DNAワクチンは、カニクイザル(最もヒト結核感染に近いモデル)で強力な結核予防効果を示した。さらに、モルモットの系でもBCGより強力な画期的な結核予防ワクチンであることを明らかにした。これらのワクチン効果とキラーT誘導活性は相関した。
3.キラーTを強めるアデノHSP65 DNAワクチン、1000倍発現効率が高い画期的なAAVベクター(HSP65 DNA)ワクチンを作製した。
4.新しい治療ワクチンの開発:IL-6関連遺伝子ワクチン(アデノウイルスベクターに導入)は初めて結核治療ワクチン(キラーT誘導増強)としても有効であることを示した。
5.IL-2レセプターγ鎖ノックアウトSCID-PBL/huのモデルでヒトキラーTを介するヒト多剤耐性結核治療モデルを開発した。

研究成果

• [文献書誌] Miki K: "Induction of protective cellular immunity against Mycobacterium tuberculosis by recombinant attenuated self-destructing Listeria monocytogenes strains harboring eukaryotic expression plasmids for Ag85 complex and MPB/MPT51."Infection and Immunity. 72(4). 2014-2021 (2004)
• [文献書誌] Mori T: "Simple and accurate detection of tuberculosis infection in BCG vaccinated individuals using a whole blood interferon-γ assay and the Mycobacterium tuberculosis specific proteins ESAT-6 and CFP-10."Am.J.Resp & Crit.Care Med.. (in press). (2004)
• [文献書誌] Koide Y: "Induction of protective cellular immunity against Mycobacterium tuberculosis by recombinant attenuated self-destructing Listeria monocytogenes strains harboring eukaryotic expression plasmids for Ag85 complex and MPB/MPT51."Rational Design of Vaccine and Immunotherapeutics Keystone Symposia. 67 (2004)
• [文献書誌] Koide Y: "Induction of protective cellular immunity against Mycobacterium tuberculosis using a DNA vaccine encoding MPB51 antigen carried by attenuated suicide Listeria monocytogenes and identification of T-cell epitopes of the antigen."Thirty-eighth Research Conference on Tuberculosis and Leprosy, US-Japan Cooperative Medical Science Program. 32-38 (2003)
• [文献書誌] Mitsuyama M: "Up-to-date understanding of tuberculosis immunity."Kekkaku. 78(1). 51-55 (2003)
• [文献書誌] Okada M: "Novel (recombinant BCG- and DNA-) vaccination against tuberculosis"Keystone Symposia. 93,335 (2003)
• [文献書誌] Okada M: "Novel (Recombinant BCG- and DNA-)Vaccination against Tuberculosis."FASEB. 17(7). C25,32.9. (2003)
• [文献書誌] Okada M: "Novel (Recombinant BCG- and DNA-)Vaccination against Tuberculosis."Thirty-Eighth Tuberculosis and Leprosy Research Conference US-JAPAN Cooperative Medical Science Program. 191 (2003)
• [文献書誌] Okada M: "Novel (Recombinant BCG- and DNA-)Vaccination against Tuberculosis."The Awaji International Forum Infection Immunity.. 3. 126 (2003)
• [文献書誌] Yoshida S: "Baculovirus virions displaying Plasmodium berghei circumsporozoite protein protect mice against malaria sporozoite infection."Virology. 316(1). 161-70 (2003)
• [文献書誌] 岡田全司: "新しい抗結核ワクチン開発の現状"結核病学会シンポジウム""結核. (in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "新たな結核ワクチン開発"特集II:感染免疫における新知見""臨床免疫. (in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "1週1話 新たな抗結核ワクチン"日本医事新報. 4121. 89 (2003)
• [文献書誌] 岡田全司: "国立病院・療養所における臨床研究と評価 呼吸器疾患(結核・肺がん)に対する臨床研究(新しい結核ワクチン,肺がんワクチン及び新しい診断法・予防法の開発)と評価"医療. 57(1). 51-53 (2003)
• [文献書誌] 岡田全司: "抗結核キラーTとリコンビナントBCG-・DNA-ワクチン・及びサブユニットワクチンの開発による新しい予防・診断・治療法(マウス、モルモット、カニクイザルを用いた)平成14年度日米医学協力計画"平成14年度日米医学協力計画 結核・ハンセン病専門部会年次報告書. 185-192 (2003)
• [文献書誌] 小出幸夫: "弱毒リステリアをキャリアとした抗結核菌DNAワクチンの研究Annual report 2002 U.S.Japan cooperative medical science program tuberculosis and leprosy panel."平成14年度日米医学協力計画 結核・ハンセン病専門部会年次報告書. 193-196 (2003)
• [文献書誌] 岡田全司: "医学の歩み:サイトカイン-state of arts"医歯薬出版(in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "家庭医学大全科:肺結核(感染症:細菌・ウイルスなどによる感染症/呼吸器)"法研(in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "家庭医学大全科:膿胸(感染症:細菌・ウイルスなどによる感染症/呼吸器)"法研(in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "家庭医学大全科:肺炎(感染症:細菌・ウイルスなどによる感染症/呼吸器)"法研(in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "家庭医学大全科:結核性髄膜炎(感染症:細菌・ウイルスなどによる感染症/呼吸器)"法研(in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "家庭医学大全科:肺膿瘍(感染症:細菌・ウイルスなどによる感染症/呼吸器)"法研(in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "結核 第4版"医学書院(in press). (2004)
• [文献書誌] 岡田全司: "結核「分子予防環境医学(生命科学研究の予防・環境医学へ統合)」"本の泉社. 150-161 (2003)