1.塩化トリブチルスズ(TBT)暴露により、CCRF-CEM細胞、NIH3T3細胞、PC12細胞およびMCF-7細胞において、MAPキナーゼ(extracellular signal-regulated protein kinase、c-Jun N-terminal kinase [JNK]、p38)のリン酸化を認めた。一方、各総MAPキナーゼ蛋白量の変化はなかった。 2.がん抑制蛋白p53のセリン15部位は、MAPキナーゼでリン酸化されるが、TBT、塩化マンガン、塩化亜鉛、塩化第2水銀および塩化鉛の暴露では、MCF-7細胞における同部位のリン酸化は認められなかった。一方、DNA傷害性を有するカドミウムやアスベスト暴露は、MCF-7細胞およびA549細胞において、p53蛋白セリン15部位をリン酸化した。TBTによるMAPキナーゼ活性化は、少なくともMCF-7細胞においては、p53蛋白リン酸化に関与していない。 3.金属暴露によるJNKシグナル伝達系の活性化を効率的に阻害する実験系を作成した。 (1)JNKキナーゼであるSEK1(MKK4)およびMKK7をそれぞれ欠損したマウス胚性幹細胞を用いる実験系。 (2)金属暴露によるJNK活性化を抑制する環状ノナケタイド化合物LL-Z1640-2を用いる実験系。 4.NIH3T3細胞およびPC12細胞において、JNKを選択的に阻害する濃度25ng/mlのLL-Z1640-2処理は、TBTやカドミウムの細胞毒性を明らかには抑制しなかった。JNKは、これらの金属暴露による細胞毒性に直接的な関与をしていない可能性がある。 5.TBTや他の金属暴露によるMAPキナーゼ活性化の意義を解明するうえで、p53蛋白セリン15部位のリン酸化、JNKキナーゼ欠損細胞やLL-Z1640-2を用いたJNKシグナル伝達阻害系における細胞毒性、の評価が有用となった。
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