アポトーシスインヒビターcIAP1の癌の悪性形質獲得への関与とその分子機構の解明

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570454
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 井本 逸勢 (橘 逸勢) 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (30258610)
• 研究分担者: 稲澤 譲治 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (30193551)
• キーワード: アポトーシス / cIAP1 / 食道癌 / 子宮頚部扁平上皮癌

研究概要

申請者らが、食道扁平上皮癌や子宮頚癌で認められる11q22増幅の標的遺伝子であることを同定した、IAPアポトーシスインヒビターファミリーに属するcIAP1の、臨床病理学的意義ならびに癌の悪性形質獲得に関わる分子機構についての検討を推進することを計画した。
1.cIAP1の癌における臨床病理学的意義に関する検討
前年度に、放射線単独治療後の子宮頚部扁平上皮癌症例の生存ならびに非再発生存の期間が、cIAP1の発現亢進のある群ではない群に比して有意に悪いことが前年度の検討で証明された。この結果をもとに、食道癌臨床例におけるcIAPl増幅例の検出をゲノムDNAマイクロアレイを用いて行うことを計画し、レーザーキャプチャーマイクロダイセクション法を行った70検体について検討を終了した。
2.cIAP1の作用とその調節の分子機構癌に関する検討
cIAP1と相互作用する分子の同定のために、bacterialおよびyeast two-hybrid systemを用いたスクリーニングを行った結果、新たに相互作用する可能性のあるミトコンドリアに局在する分子が検出された。しかし、この分子の全コード領域を含むコンストラクトの強制発現系を用いた検討では、噛乳動物細胞内でのcIAPlとの相互作用は確認されなかった。このため、タグ付きのcIAP1の強制発現後免疫沈降法により共沈される蛋白をTOF-MSにより同定する解析法を導入することで、相互作用をする分子の同定を行い複数のクローンを得た。
一方、siRNAを用いた一時的なノックダウンにより、cIAP1を高発現する細胞株の少なくとも一部においてにおける細胞死の誘導や薬剤抵抗性の解除が認められることを確認した。

研究成果

• [文献書誌] Imoto I, Inazawa J, et al.: "Identification of ZASCl encoding a Kruppel-like zinc finger protein as a novel target for 3q26 amplification in esophageal squamous-cell carcinomas."Canser Research. 63. 5691-5696 (2003)
• [文献書誌] Hirasawa A, Imoto I, Inazawa J, et al.: "Unfavorable prognostic factors associated with high frequency of microsatellite linstability and comparative genomic hybridization analysis in endometrial cancer."Clinical Cancer Research. 9. 5675-5682 (2003)
• [文献書誌] Yokoi S, Imoto I, Inazawa J, et al.: "TERC identified as a probable target within the 3q26 amplicon that is detected frequently in non-small cell lung cansers."Clinical Cancer Research. 9. 4705-4713 (2003)
• [文献書誌] Hirasawa A, Imoto I, Inazawa J, et al.: "Association of 17q21-q24 gain in ovarian clear cell adenocarcinomas with poor prognosis and identification of PPM1D and APPBP2 as likely amplification targets."Clinical Cancer Research. 9. 1995-2004 (2004)
• [文献書誌] Yu W, Imoto I, Inazawa J, et al.: "GPC5 is a possible target for the 13q31-q32 amplification detected in lymphoma cell lines."Journal of Human Genetics. 48. 331-335 (2003)
• [文献書誌] Yasui K.Imoto I, Inazawa J, et al.: "Alteration of copy numbers of genes as a mechanism for acquitted drug resistance."cancer Research. 印刷中. (2004)