炎症性腸疾患病態形成への腸内細菌叢由来二次胆汁酸の関与と腸管上皮細胞UGT発現

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570462
• 研究機関: 滋賀医科大学
• 研究代表者: 藤山 佳秀 滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (70111896)
• キーワード: 炎症性腸疾患 / 胆汁酸 / hodeoxcholic acid / UGT / 腸内細菌叢

研究概要

炎症性腸疾患病態形成への腸内細菌叢由来二次胆汁酸の関与を検討する目的で、新規のヒト便中胆汁酸分離定量法を開発し、ヒト炎症性腸疾患類似腸病変自然発症モデルであるSAMP1/Yitマウスを用いて経時的に便中胆汁酸定量を行い、発症への関与を検討した。便中胆汁酸分離定量法については、既に確立され臨床応用されている方法があるが、親水性画分については試料中の夾雑物との分離が困難なことから従来見過ごされてきた。そこで、グルクロン酸脱抱合処理を前処理に加えることで、グルクロン酸抱合胆汁酸に焦点を絞った胆汁酸描出法を開発し、従来の描出法を凌駕する広範な胆汁酸描出が可能となることを明らかにした。すなわち、エタノール抽出した胆汁酸をβグルクロニダーゼにて脱抱合の後、ソルボリシス、アミノ酸アルカリ分解ステロール分画の除去、Dimethoxycoumarin化(蛍光化)し、5C18-ARカラムを用いたHPLCに展開するものである。本法にてSAMP1/Yitマウスの便中胆汁酸画分を検討した結果、hyodeoxycholic acidが経時的に増加し、とくに自然発症に先行した10週令を境に濃度、総胆汁酸中モル比が急速に増加することが見出され、腸病変形成へのhyodeoxycholic acidの関与を強く支持する結果を得た。
現在、炎症性腸疾患症例での便中hyodeoxycholic acidに注目した解析のために検討数を積み重ねている。
一方、胆汁酸代謝に関わるuridine-diphosphate-glucuronosyl-transferase 1A3について腸管内発現、genomic DNAを用いた変異・多型性の検索に関する基礎的検討を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Fujino S, 他4名ujiyama Y(4番目): "Increased expression of interleukin-17 in inflammatory bowel disease."Gut. 52(1). 65-70 (2003)
• [文献書誌] Andoh A, Tsujikawa T, Fujiyama Y.: "Role of dietary fiber and short-chain fatty acids in the colon"Curr Pharm Design. 9(4). 347-358 (2003)
• [文献書誌] Makino J, 他7名Fujiyama Y(7番目): "Inhibitory effects of the new anti-inflammatory agent, IS-741, on spontaneous colitis in HLA-B27/beta2-microglobulin transgenic rats"J Gastroenterol Hepatol. 17(8). 854-860 (2002)
• [文献書誌] Bamba T, Kanauchi O, Andoh A, Fujiyama Y.: "A new prebiotic from germinated barley foodstuff for nutraceutical treatment of ulcerative colitis"J. Gastroenterol Hepatol. 17(8). 818-824 (2002)
• [文献書誌] Hata K, 他8名Fujiyama Y(8番目): "IL17 stimulates inflammatory responses via NF-kappa B and MAP kinase pathways in human colonic myofibroblasts"Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 282(6). 1035-1044 (2002)
• [文献書誌] Araki Y, 他6名Fujiyama Y(7番目): "Dietary bile acids inhibit potentially elemental diet-induced small intestinal atrophy in rats"Int J Mol Med.. 10(5). 623-626 (2002)
• [文献書誌] Itoh M, 他5名Fujiyama Y(5番目): "Effect of a conserved mutation in uridine-diphosphate-glucuronosyl-transferase 1A1 and 1A6 on glucuronidation of a metabolite of flutamide"Eur J Clin Pharmacol. 58(1). 11-14 (2002)