ナチュラルキラーT細胞の活性化による肝発癌の制御

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570468
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 竹原 徹郎 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (70335355)
• 研究分担者: 外山 隆 大阪大学, 医学部附属病院, 医員(臨床研究) ; 平松 直樹 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座教員 (30362700)
• キーワード: NK細胞 / IL-12 / IFNα / 肝臓 / 遺伝子治療 / 腫瘍 / 先天免疫 / 獲得免疫

研究概要

肝臓はNKT細胞やNK細胞をはじめとする先天免疫応答に関与する細胞が豊富に存在する臓器である。これらの先天免疫応答は、肝臓における腫瘍の発生や進展に対する初期の免疫防御機構を形成するとともに、その後の獲得免疫応答の方向性の決定にも重要な役割を持っていることが推察されている。本年度はIFNαおよびIL-12遺伝子を発現するプラスミドをマウス尾静脈より静注し、生体内でこれらの遺伝子を高発現させることにより、免疫応答がどのように誘導され、抗腫瘍免疫の誘導に関与するかを解析した。IL-12遺伝子あるいはIFNα遺伝子の静注により、それぞれ大量のIL-12とIFNαが血清中に検出された。また、両サイトカインともIFNγ産生を誘導した。モック注入マウスではこれらの血清レベルは感度以下であった。IL-12およびIFNα遺伝子注入は肝臓および脾臓の単核球のNK活性を約2週間にわたって著明に上昇させた。腫瘍細胞を脾臓注入し、2日後に遺伝子を静注したところ、IL-12、IFNα遺伝子ともに肝臓での腫瘍の形成を完全に抑制した。また、この効果はアシアロGM1抗体の投与により消失したことから、NK細胞の活性化に依存した現象であった。このような遺伝子導入により腫瘍が拒絶されたマウスでは、3週間後に腫瘍細胞に対する特異的なCTL反応が誘導され、腫瘍細胞の再接種に対して、IL-12投与群では完全に、IFNα投与群では部分的に耐性であった。IL-12遺伝子あるいはIFNα遺伝子の静注により、肝NK細胞が活性化され、肝内微小散布性癌の形成が完全に抑制された。IL-12やIFNαは肝臓内の先天免疫応答を始動させ、肝臓を場とした抗腫瘍免疫応答を活性化する上で有用なサイトカインであり、また後に獲得免疫の誘導も惹起した。

研究成果

• [文献書誌] Miyagi T, Takehara T, et al.: "CD1d-mediated stimulation of natural killer T cells selectively activates hepatic natural killer cells to eliminate experimentally disseminated hepatoma cells in murine liver"International Journal of Cancer. 106(1). 81-89 (2003)
• [文献書誌] Jinushi M, Takehara T, et al.: "Expression and role of MICA and MICB in human hepatocellular carcinomas and their regulation by retinoic acid"International Journal of Cancer. 104(3). 354-361 (2003)
• [文献書誌] Jinushi M, Takehara T, et al.: "Critical role of MHC class I-related chain A and B expression on interferon α-stimulated dendritic cells in NK cell activation : Impairment in chronic hepatitis C virus infection"Journal of Immunology. 170(3). 1249-1256 (2003)
• [文献書誌] Jinushi M, Takehara T, et al.: "Autocrine/paracrine IL-15 that is required for type I IEN-mediated dendritic cell expression of MHC class I-related chain A and B is impaired in hepatitis C virus infection"Journal of Immunology. 171(10). 5423-5429 (2003)
• [文献書誌] Takehara T, Takahashi H. et al.: "Suppression of Bcl-xL deamidation in human hepatocellular carcinomas"Cancer Research. 63(12). 3054-3057 (2003)
• [文献書誌] Suzuki T, Takehara T, et al.: "Intravenous injection of naked plasmid DNA encoding hepatitis B virus (HBV) produces HBV and induces humoral immune response in mice"Biochem Biophys Res Commun. 300(3). 784-788 (2003)