広汎肝細胞死の成立に対する肝細胞アポトーシスの関与とその制御に関する研究

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570500
• 研究機関: 岩手医科大学
• 研究代表者: 滝川 康裕 岩手医科大学, 医学部, 講師 (50254751)
• 研究分担者: 遠藤 龍人 岩手医科大学, 医学部, 助手 (70316355)
• キーワード: 劇症肝炎 / 肝細胞 / アポトーシス / プロスタグランディン / 血液凝固

研究概要

1.アポトーシス肝細胞における血液凝固触媒能の亢進に関する実験
方法:(1)肝癌細胞株Hep G2にStaurosporin(STS : 200 nM,1000nM)を用いてアポトーシスを誘導.(2)肝細胞10^6個に血液凝固第II因子(FII)、活性化第X因子(FXa)、CaCl_2を加え、生成した活性化FIIをその特異的発色基質であるを用いて定量.実験結果:(1)アポトーシスに陥った肝細胞の比率(apoptosis index : AI)は対照4.7±2.0%、STS 200 nM 35.4±1.9%、STS 1000 nM48.5±2.6%であった.(2)incubation20分におけるFII活性(OD)は対照0.057、STS 200nM 0.098、STS 1000nM 0.156であった.結論:アポトーシス肝細胞では血液凝固触媒能が亢進した.
2.プロスタグランディン受容体アゴニスト(EP4A)による肝細胞Bcl-2ファミリー蛋白の誘導とアポトーシス抑制に関する実験
方法:Hep G2にanti-Fas agonistic antibody (CH11)およびIndometacin (Ind)を用いてアポトーシスを誘導するとともに、EP4A(ONO-AE1-437)によるアポトーシス抑制およびBcl-xL, Mcl-1の誘導Western blottingで評価.結果:(1)刺激6時間後のAIはCH11単独,CH11+Ind、CH11+ONO-AEl-437でれぞれ32%,43% and 16%であった.(2)Bcl-xL、Mcl-1ともに、ONO-AEl-437投与後30分から180分の間に有意の蛋白発現の増加を認めたが、Ind投与では変化を示さなかった.結論:EP4Aは肝細胞に抗アトーシス蛋白であるBcl-xL、Mcl-1を誘導し、有意に肝細胞アポトーシスを抑制した.

研究成果

• [文献書誌] 滝川康裕: "胆汁酸によるアポトーシス誘導と細胞生存シグナル経路"肝胆膵. 46・1. 27-34 (2003)
• [文献書誌] 滝川康裕: "胆汁酸とNF-κBの活性化"Bio Clinica. 17・11. 994-998 (2002)
• [文献書誌] Lin, SD, Endo, R, Takikawa, Y, et al.: "Plasma and urine levels of urinary tripsin inhibitor in patients with acute and fulminant hepatitis"J Gastroenterol Hepatol. 17. 140-147 (2002)
• [文献書誌] 滝川康裕, 鈴木一幸: "劇症肝炎・LOHFの現況. 内科的治療"日本消化器病学会誌. 99・7. 905-912 (2002)
• [文献書誌] Mizuno, H, Suzuki, K, Takikawa, Y, et al.: "Polyphyletic strains of hepatitis E virus are responsible for sporadic cases of acute hepatitis in Japan 2002:40:3209-3218"J Clin Microbiol. 40. 3209-3218 (2002)
• [文献書誌] Takikawa, Y, Suzuki, K: "Is AFP a new reliable marker of liver regeneration in acute hepatic failure?"J Gastroenterology. 37. 681-682 (2002)