アンジオテンシンII受容体とサイトカイン受容体間情報伝達調節の新規メカニズム

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570629
• 研究機関: 旭川医科大学
• 研究代表者: 福澤 純 旭川医科大学, 医学部, 助手 (40333695)
• キーワード: アンジオテンシンII受容体 / サイトカイン受容体 / 細胞内情報伝達系 / クロストーク / JAK / STAT / カベオラ / チロシンリン酸化 / 培養心筋細胞

研究概要

ラット新生仔心室筋培養細胞を用いた実験
1.受容体レベルでAngIIを阻害し(アンジオテンシII受容体拮抗薬RNH-6270による前処置による)、CT-1を投与した際にSTAT3活性化が無処置群と比較して抑制されていた。
2.リガンドレベルでAngIIを抑制し(アンジオテンシノーゲンに対するアンチセンス処置と培養液交換後にアンジオテンシン変換酵素阻害薬テモカプリルの活性体であるテモカプリラート前処置を行う)、CT-1を投与した際にSTAT3活性化が無処置群と比較して抑制された。
3.リガンドレベルでのAngIIの抑制処置を行い、閾値下濃度の外因性AngIIを前投与しCT-1によるSTAT3の活性化がおこることを見出した。(AngII抑制下での外因性AngIIのSTAT3活性化の濃度依存性を検討し、「閾値」を決定した後に施行した。)
4.カベオラドメインの機能的阻害(filipinの投与)を行うとCT-1によるSTAT3の活性化抑制された。また、filipinを除去した際(filipinの効果は可逆的であると報告されている)にはその抑制が解除された。
5.上記、それぞれの条件下での心筋肥大の程度を検討した。CT-1による心筋肥大は(1)RNH-6270、(2)テモカプリラート+アンジオテンシノジェンのアンチセンス処置、(3)filipinの投与にいよりそれぞれ抑制された。
6.カベオラとAngII受容体およびgp130の会合をウェスタンブロット法により確認した。
今後はCHO細胞(chinese hamster ovary cell)にアンジオテンシンII受容体および細胞内ドメインに変異を導入した同受容体細胞を過剰発現させた系を用いて研究を進める。

研究成果

• [文献書誌] Fukuzawa, J, et al.: "Contribution of macrophage migration inhibitory factor to extracellular signal-regulated kinase activation by oxidative stress in cardiomyocytes"The Journal of Biological Chemistry. 277. 24889-24895 (2002)
• [文献書誌] Fujino, T, et al.: "Characterization of the receptors mediating the effects of the prostanoids on the proliferation or hypertrophy of the cultured aortic smooth muscle cells : A study using mice deficient in prostanoids receptors"British Journal of Pharmacology. 136. 530-539 (2002)
• [文献書誌] Fukuzawa, J, et al.: "Subthreshold signal by local renin-angiotensin system facilitates the cardiotrophin-1-induced strong activation of JAK/STAT signaling pathway and cardiomyocyte hypertrophy"Circulation. 106. 280 (2002)
• [文献書誌] Fujino, T, et al.: "Effect of β-adrenergic antagonist and an angiotensin-converting enzyme inhibitor on hypertension-associated changes in adenylyl cyclase type V mRNA expression in spontaneously hypertensiver rats"Journal of Cardiovascular Pharmacology. (印刷中).