動脈管血管トーヌスにおける一酸化窒素の役割とその制御

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570715
• 研究機関: 旭川医科大学
• 研究代表者: 梶野 浩樹 旭川医科大学, 医学部, 講師 (70292109)
• 研究分担者: 藤枝 憲二 旭川医科大学, 医学部, 教授 (60173407) ; 津田 尚也 旭川医科大学, 医学部, 助手 (10302001)
• キーワード: 動脈管 / 一酸化窒素 / エストロゲン / 一酸化窒素合成酵素 / 遺伝子多型

研究概要

【研究課題 1】仮説「胎児期の高濃度の血中estrogenは一酸化窒素(NO)を介して胎児の動脈管を開存させる機転に寄与している。また生後動脈管が閉鎖する機転にもそのestrogenの供給が絶たれたことが関与している」に対し、estrogen receptor blockerのtamoxifenとICI 182780、cyclooxygenase inhibitorのindomethacin、NOS inhibitorのL-NAMEを妊娠ラットに皮下投与した。その後胎仔を摘出・瞬間凍結したのち組織切片を作成し、切片上の肺動脈と動脈管の血管径を比較し動脈管収縮の有無を調べた。(結果)このin vivoの実験において、indomethacin、L-NAMEは予想通り動脈管を収縮させたが、estrogen receptor blockerであるtamoxifenとICI 182780は有意な収縮をさせなかった。(結論)昨年度に引き続きin vivoの追加実験として投与方法の変更を試みたが、この実験系では動脈管に対するestrogenの作用はやはり証明されなかった。(今後の方針)in vitroの実験系において、ラット胎仔の動脈管を摘出、灌流漕に浴し薬理学的な処置を加えながら等尺性張力を測定する。さまざまな酸素分圧下でestrogen投与時の張力を測定するとともに、in vivoの実験と同様にtamoxifen、ICI 182780、indomethacinやL-NAME投与との関係を調べる。
【研究課題 2】仮説「未熟児において、indomethacinに反応する動脈管と反応しない動脈管では、ecNOS geneのpolymorphismのパターンに差がある」に対し、ヒトにおけるecNOS geneのpolymorphismの同定を開始した。特にExon 7のpolymorphism、894G/T ; Glu296Aspについては、虚血性心疾患や高血圧との関連が指摘されている。このpolymorphismが血管の閉塞を促進すると仮定すると、低出生体重児に発症する動脈管開存に対してインドメタシンが投与された時に動脈管がより閉鎖しやすいという可能性を考えている。
正常群のDNAからNOS遺伝子のpolymorphismのうちGlu296AspについてPCRで増幅後direct sequenceによって解析を行った。倫理委員会の許可を取得したので、現在低出生体重児出身者からDNA検体を収集、解析中である。

研究成果

• [文献書誌] Kajino H, Goldbarg S, Roman D, Liu BM, Mauray F, Chen YQ, Takahashi Y, Koch CJ, Clyman RI.: "Vasa vasorum hypoperfusion is responsible for medial hypoxia and anatomic remodeling in the newborn lamb ductus arteriosus"Pediatric Research. 51. 228-235 (2002)
• [文献書誌] 梶野浩樹, Ronald I. Clyman: "周産期における動脈管の制御"日本小児循環器学会雑誌. 18. 364-371 (2002)
• [文献書誌] Kajino H, Roman C, Clyman RI.: "Renal Effects of Cyclooxygenase-2 Inhibition in Fetal Lambs"Biol Neonate. 82. 257-262 (2002)
• [文献書誌] Hiroki Kajino, N Waleh, JC Fouron, A Vazquez, S Chemtob, RI Clyman: "Regulation of prostaglandin(PGE2)-mediated relaxation of the fetal lemb ductus arteiosus"Pediatric Research. 53,4. Part2,37A (2003)