後腎間葉細胞を用いた腎上皮細胞再生の試み

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14570772
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 粟津 緑 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20129315)
• 研究分担者: 藤田 尚代 慶應義塾大学, 保健管理センター, 助手 (90296624) ; 飛彈 麻里子 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20276306)
• キーワード: MAPキナーゼ / 後腎間葉細胞 / p38 / DNAアレイ / 上皮化 / 凝集

研究概要

後腎間葉細胞から上皮細胞への分化を誘導する遺伝子の検討
私たちはMAPキナーゼファミリーのp38がネフロン形成に必須であることを報告した。すなわちp38阻害薬SB203580(SB)存在下で培養した後腎では後腎間葉細胞の尿管芽先端への凝集、上皮化がみられない。この過程に関与する遺伝子群をDNAアレイ法により解析した。
【方法】胎生15日ラット腎をSB 30μM存在下、非存在下で4日間器官培養後RNAを抽出、Atlas Plastic Rat 4K Microarray (Clontech)により解析、Stuartらの腎発生における5種類の遺伝子発現パターンに分類した。
【結果】対照に比し2.0倍以上の発現増加を示した遺伝子は66、低下した遺伝子は54。Group1(発達に伴い発現低下)は8(tubulinα1、ribonucleoprotein F等)、Group4(発達に伴い増加)は7(TIMP3、ninjurin等)、Group2(胎児期に増加後低下)は2(annexinVI、collagenαtype1)。その他はStuartの分類に存在しなかった。発現増加した遺伝子にはリボゾーム蛋白、細胞骨格(βactin)、シグナル伝達分子(phospholipase A2、Cγ1)、細胞周期蛋白(CDK5)、成長因子(midkine、MIF)などが含まれ、低下した遺伝子はリボゾーム蛋白、細胞骨格(SMA、keratin)、成長因子(persephin)、シグナル伝達分子(LMP-1、RPTPKκ)などであった。
【結論】p38が制御する、腎発生への関与が未報告の遺伝子が多数検出された。この中に腎成長、ネフロン形成に必要な遺伝子が存在する可能性がある。

研究成果

• [文献書誌] Awazu, M.: "The cyclin kinase inhibitor p27^<Kip1> is required for diabetic glomerular hypertrophy."J.Am.Soc.Nephrol.. 14. 699-799 (2003)
• [文献書誌] Hida, M.: "Eicosapentaenoic acid inhibits PDGF-induced mitogenesis and cyclin D1 expression via TGF-β in mesangial cells."J.Cell.Physiol.. 196. 293-300 (2003)
• [文献書誌] Fujita, H.: "Role of high glucose-stimulated ERK and p38 in renal tubular cells."Am.J.Physiol.. 286. F120-F126 (2004)
• [文献書誌] Fujita, H.: "Genitourinary anomaly in congenital varicella syndrome : Case report and review of the Literature."Pediatr.Nephrol.. 印刷中.
• [文献書誌] 飛彈麻理子: "腎発生におけるRhoA、ROCKの発現と機能的意義"発達腎研究会誌. 11. 19-25 (2003)
• [文献書誌] 大森さゆ: "ヒツジ胎仔尿路閉塞モデルにおけるMAPキナーゼ"発達腎研究会誌. 印刷中.
• [文献書誌] Awazu, M.: "Role of extracellular signal-regulated kinase in murine polycystic kidney disease."J.Am.Soc.Nephrol.. 14. 365A (2003)
• [文献書誌] Hida, M.: "Microarray analysis of genes regulated by p38 mitogen-activated protein kinase during kidney development."J.Am.Soc.Nephrol.. 14. 368A (2003)
• [文献書誌] Fujita, H.: "Cyclic stretch stimulates proliferation and expression of Pax2 and TGF-β1 via ERK in a ureteric bud cell line."J.Am.Soc.Nephrol.. 14. 96A (2003)
• [文献書誌] Omori, S.: "Temporal analysis of mitogen-activated protein kinase (MAPK) expression, proliferation, and apoptosis in obstructive uropathy in fetal lambs."J.Am.Soc.Nephrol.. 14. 90A (2003)
• [文献書誌] 大森さゆ: "ヒツジ胎仔尿路閉塞モデルにおける嚢胞形成の経時的検討"日本腎臓学会会誌. 印刷中. (2004)
• [文献書誌] 粟津緑: "多発性嚢胞腎モデルpcyマウスにおけるERKの病因的意義"日本腎臓学会会誌. 印刷中. (2004)
• [文献書誌] 飛彈麻里子: "腎発生における受容体型チロシンフォスファターゼRPTPκの発現と機能的意義"日本腎臓学会誌. 印刷中. (2004)
• [文献書誌] 藤田尚代: "培養尿管芽細胞周期的伸展刺激によるアポトーシス誘導. -p38、ERKの役割-"日本小児腎臓病学会誌. 印刷中. (2004)
• [文献書誌] 飛彈麻里子: "多嚢胞性異形成腎の新生児期症状発現の危険因子"日本小児科学会誌. 印刷中. (2004)
• [文献書誌] 粟津緑: "青年期における仮面高血圧の検討"日本小児科学会誌. 印刷中.
• [文献書誌] 粟津緑: "先天性水痘症候群における腎尿路奇形. -症例報告および文献的考察-"日本小児腎臓病学会. 印刷中.
• [文献書誌] 粟津緑: "小児科研修医ノート"五十嵐隆、渡辺博、田原卓浩. 702 (2003)
• [文献書誌] 粟津緑: "今日の治療指針2003年版"山口 徹、北原光夫. 1605 (2003)
• [文献書誌] 粟津 緑: "臨床に直結する腎疾患治療のエビデンス"黒川清. 402 (2003)
• [文献書誌] 粟津緑: "今日の小児治療指針第13版"大関武彦、古川漸、横田俊一郎.. 690 (2003)