| 研究概要 |
1.常染色体優性腎性尿崩症の自験例で認められた変異AQP2(763-772del)を、腎由来培養細胞であるMDCK細胞に発現させ、尿崩症発症の機序を検討した。野生型AQP2は頂側膜に局在したのに対して、変異AQP2は側底側に局在した。しかも、共発現細胞では、野生型AQP2と変異AQP2はヘテロオリゴマーを形成し、側底側に存在した。以上より、変異AQP2のドミナントネガティブ効果によるトラフィッキングの障害が尿崩症発症原因と考えられた。
2.AQP2C末端のどのアミノ酸が頂側膜へのトラフィッキングに関与するかを検討した。AQP2のC末端アミノ酸欠失変異体を用いた検討で、最終10アミノ酸残基が頂側膜へのトラフィッキングを決定していることが示唆された。
3.常染色体劣性腎性尿崩症で、新規の変異AQP2(Q57P, G100V)を同定した。これらの変異AQP2をアフリカツメガエル卵母細胞に発現させた。野生型AQP2は形質膜に発現したが、変異AQP2は細胞内にとどまっていた。したがって、変異AQP2のトラフィッキング障害が尿崩症発症原因と考えちれた。
4.腹膜組織に存在するAQP1の浸透圧による調節を検討した。高浸透圧への暴露によってラット腹膜中皮細胞におけるAQP1の発現は、24時間後、48時間後で有意に増加した。また、同時に細胞膜の水透過性の亢進もみられたため、高浸透圧がAQP1の発現調節に関与していることが示唆された。
5.新規水チャネルAQP10をクローニングした。AQP10は小腸のみに特異的に発現していた。アフリカツメガエル卵母細胞を用いた機能的検討では、AQP10は水のみでなくグリセオールなどの小分子にも透過性を有していた。
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