| 研究課題/領域番号 |
14571085
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
代謝学
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| 研究機関 | 群馬大学 |
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研究代表者 |
戸村 秀明 群馬大学, 生体調節研究所, 助教授 (70217553)
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| 研究分担者 |
岡島 史和 群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (30142748)
武田 純 群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (40270855)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| キーワード | スフィンゴシン 1-リン酸 / DNAマイクロアレイ / コレステロール代謝 / 肝細胞 / 血漿リポタンパク |
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| 研究概要 |
「血漿リポタンパクに含まれるスフィンゴシン1-リン酸(S1P)が、コレステロール代謝を制御する外部シグナルのひとつである」という仮説を検証するため、1.DNAマイクロアレイを用いたS1P応答遺伝子の網羅的収集と、2.コレステロール代謝に重要な「hepatocyte nuclear factor(HNF)4α・HNF1α・small hetrodimer partner(SHP)」という各転写因子の遺伝子発現に対するS1P作用を検討した。
1.に関しては、14年度はマウス肝細胞の調製に難があったため、ヒト肝癌由来細胞株(HepG2)を使用した。DNAマイクロアレイを使用して、S1Pに応答し発現が減弱する候補遺伝子群を選択した。しかしながら、TaqManシステムを用いてそれらの発現変化を定量化した結果、再現性のある結果が得られなかった。そこで、文献サーチを行い、S1P刺激で発現が変化する可能性のある遺伝子群を選択し、TaqManシステムを用いてそれらの発現変化を定量化した。その結果、Neuron-derived orphan receptor-1(NOR-1)と呼ばれる核内受容体の発現が、S1P刺激により増加することを見い出した。15年度になり、安定したマウス肝細胞の調製が可能となった。そこで正常肝細胞に於いても肝癌細胞の場合と同様に、NOR-1の発現がS1P刺激により増大することかどうかを調べた。その結果、マウス初代培養肝細胞に於いても、S1P刺激によりNOR-1の発現増加が観察された。一方2.に関しては、現在までにS1P刺激によるHNF4α、HNF1α、SHPの各遺伝子発現の変化は観察できず、報告とは異なる結果を得た。
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