研究課題/領域番号 |
14571156
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
外科学一般
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研究機関 | 慶應義塾大学 |
研究代表者 |
神野 浩光 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20216261)
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研究分担者 |
麻賀 創太 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00327529)
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研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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キーワード | Epidermal Growth Factor / Eosinophil Cationic Protein / ターゲテイング療法 / 乳癌 / 内因性物質 |
研究概要 |
Eosinophil cationic protein(ECP)はRibonuclease(RNase)familyのひとつであるEosinophil cationic protein(ECP)とヒトepidermal growth factor(EGF)をSS結合にて架橋した。EGF-ECP conjugateはEGF receptor過剰発現乳癌細胞株BT-20に対して用量依存性に殺細胞効果を示し、そのIC_<50>は1.5x10^<-7>Mであった。ECP単独投与ではBT-20に対する効果は10^<-6>Mの高濃度でも認められなかった。EGF receptor非発現株であるH69に対しては、conjugateは10^<-6>Mの高濃度でも効果を示さなかった。また、過剰量のEGFを投与することにより、conjugateのBT-20に対する効果は阻害された。さらに細胞株のEGF receptor発現程度とconjugateの殺細胞効果の間に相関関係を認めた。これらのことより、EGF-ECP conjugateの効果はEGF receptorを介していることが示唆された。EGFとRNaseのcDNAをスペーサーを介して結合させたキメラ遺伝子を発現ベクターに組み込み、大腸菌に封入体の形で産生させた。その後、精製し、refoldingを行なった。In vitroではEGF receptor過剰発現株であるA431に対して用量依存性に殺細胞効果を示し、そのIC_<50>は約10^<-8>Mであった。EGF-RNase conjugateはやはりEGF receptor非発現株であるH69に対しては効果を示さなかった。さらに、EGF-RNase conjugateのアドリアマイシン(ADR)耐性MCF-7細胞に対する効果を検討したところ、EGF-RNase conjugateはADR耐性MCF-7細胞に対して用量依存性に殺細胞効果を示したが、EGF単独、RNase単独、両者の混合物はほとんど効果を示さなかった。以上より、抗癌剤耐性乳癌に対してもEGFR発現陽性ならばEGF-RNase conjugateは有効である可能性が示唆された。
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