| 研究課題/領域番号 |
14571208
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
黒木 祥司 九州大学, 大学病院, 講師 (30215090)
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| 研究分担者 |
能城 浩和 九州大学, 大学病院, 助手 (90301340)
清水 周次 九州大学, 大学病院, 助教授 (70274454)
千々岩 一男 宮崎大学, 医学部, 教授 (90179945)
大島 章 九州大学, 大学病院, 助手 (70335959)
中野 賢二 九州大学, 大学病院, 助手 (00315061)
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| キーワード | 胆汁酸合成 / 調節機構 / コレステロール7α酸化酵素 / 胆汁酸代謝 / 腸管因子 / ラット |
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| 研究概要 |
胆汁酸合成は肝に還流する胆汁酸と核内レセプターFXRとが結合することにより制御されているとされているが、静脈内に胆汁酸を投与すると、十二指腸内に投与した場合とは異なり、胆汁酸合成の抑制が起こらないことが報告されている。そこで我々は胆汁外瘻により胆汁酸を除去すると同時に、同量の胆汁酸を十二指腸内、静脈内、門脈内に投与することにより、腸肝循環を再構成した動物モテルを作成し、胆汁酸による胆汁酸整合性の制御を検証した。
まず実験条件を設定するために、ラットに胆汁外瘻を作成し、十二指腸内にチューブを挿入して電解質液を注入し、時間毎に胆汁を採取、時間毎の胆汁酸排泄量を測定し、胆汁酸合成が最大値に達してプラトーとなるタイミンクを調べた。胆汁外瘻を行うと、胆汁中胆汁酸排泄量は速やかに減少して約12時間後に最低値を取り、その後次第に増加して、約36時間後にはプラトーに達した。この結果をもとに胆汁酸投与時間を48時間に設定した。
ついで、設定した実験条件下で、タウロコール酸を十二指腸内、静脈内、および門脈内に投与し、電解質液のみ投与する対照群と比較した。各群とも48時間後に再度麻酔下に開腹し、血液、肝組織を採取、肝7α水酸化酵素(CYP7A1)活性、mRNA、胆汁中胆汁酸排泄量を測定した。
胆汁外瘻のみを行うと、CYP7A1活性は8.9±0.9pmol/min/mg proteinから52.6±5.1へと約5.5倍に増加し、mRNAの発現も増加した。十二指腸内にタウロコール酸を6μmol/hr/100g体重で投与したところ、CYP7A1活性は21.4±3.1と有意に抑制され、mRNAの発現も有意に抑制された。しかしながら酵素活性は静脈内投与では39.6±5.6、門脈内投与では30.3±4.0と胆汁酸非投与群に比べ低下傾向を認めたものの、有意な抑制効果を認めず、mRNAの発現も有意差がなかった。
以上より、十二指腸内に胆汁酸を投与するとCYP7A1は抑制されるが、同量の胆汁酸を静脈内あるいは門脈内に投与してもCYP7A1は有意に抑制されず、胆汁酸合成の核内レセプターFXR以外の胆汁酸合成制御因子が存在することが示唆された。
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