研究概要 |
段階的根治手術が予想される初回姑息手術時、10mlの骨髄細胞を完全清潔下に採取し、直ちに細胞接着蛋白でコーティングされた生分解性ポリマーの一弁つきの肺動脈弁(10×20mm)に接着播種させ、組織培養液に浸漬し、手術室内の細胞培養室にて約1時間37℃でインキュベートを行った。単純裁断法を用いて組織の断片化を行った。細胞培養液はRPMI(Sigma Chemicals, St.Louis, MO)及び1%GPS(29.2mg/mL L-glutamine,10,000 units/mL penicllin G, sodium, and 10,000g/mL streptomycin, GIBCO BRL-Life Technologies, grand island, NY) VEGF(Vascular Endothelial Cell Growth Factor) FGF(fibroblast growth factor) HGF(hepatic growth factor)を添加したDulbecco's Modified Eagle Medium(GIBCO BRL-Life Technologies, grand island,.NY)を使用した。移植術後約1ケ月後に、心臓カテーテル、造影検査、心臓超音波検査を行いフォローアップは6ヶ月毎にに心臓超音皮検査を用いて形態学的検索及び組織過形成の有無等を経過観察した。術後遠隔期にも心臓超音波検査を施行した。再手術時に肺動脈弁移植部の組織片を客観的に評価した後、小組織を採取し、人工肺動脈弁組織と自己組織弁を生化学的、生力学的、免疫組織学的に比較検討した。
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