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【目的】腫瘍壊死因子であるTNF-αは、多くの細胞種において耐性を示す事が報告されている。TNF-αはFasなどと共にアポトーシスシグナルを活性化するが、それと同時に生存シグナルも活性化され、これが耐性の原因と考えられている。この生存シグナルとしてNF-κBが報告されているが、詳細は不明である。今回、このTNF-αに耐性を示す悪性黒色種細胞株BL-6において、PKCを阻害する事でこのTNF-αの耐性を克服する事を見い出すとともに、その耐性機序の解明を試みた。
【方法】B16melanomaBL-6細胞を使用し、PKC、Akt、MEK及びP-38を阻害後、TNF-αによる細胞死をWST-8法により測定した。また、H7によりPKC阻害後のNF-κB、MEK及びJNKの活性をウエスタンブロット法により検出した。
【結果および考察】BL6細胞にPKC阻害剤であるH7処理後TNF-αを作用させた結果、ほとんどの細胞において細胞死を誘導した。また、PKCに関与すると考えられる細胞内生存シグナルの各阻害剤を作用させた結果、MEK阻害剤であるU0126処理後TNF-αの投与により、細胞死を誘導した。また、生存シグナルとして働くNF-κBについてはPKC阻害に伴うタンパク発現に大きな変化が認められなかった。このことからBL-6細胞のTNF-αに対する耐性は、PKC、Raf及びMEKを介した生存シグナルが関与している事が認められた。
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