| 研究課題/領域番号 |
14580744
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
神経化学・神経薬理学
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
山田 康枝 山口大学, 医学部, 助手 (00166737)
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| 研究分担者 |
高 知愛 山口大学, 医学部, 助手 (70314797)
木村 佳弘 山口大学, 医学部, 講師 (90301308)
乾 誠 山口大学, 医学部, 教授 (70223237)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| キーワード | NMDA受容体 / PSD-95 / MALS-2 / Xenopus oocyte / PKC / Src / PDZ domain / GKAP |
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| 研究概要 |
NMDA受容体チャンネルがPSD-95やそれ以外の細胞膜骨格蛋白質との直接の相互作用によりどのような活性制御を受けるかを解明するために、アフリカツメガエル卵母細胞発現系を用いて検討した。
1)NMDA受容体の4つのサブタイプのうちPSD-95が共存すると、NR1/NR2A、NR1/NR2B、及びNR1/NR2Dの活性が増強した。
2)MALS-2はNR1/NR2Bの活性を増強し、グルタミン酸に対する感受性を低下させたが、NR1/NR2Aには影響を与えなかった
3)PSD-95によるNBMDA受容体活性制御の機構を解明するために、MALS-2とPSD-95のキメラ変異体を作成し、その効果をNR1/NR2A及びNR1/NR2B受容体で比較検討した。その結果PSD-95のNR1/NR2Aサブタイプ受容体のPKによる活性化の抑制には、PSD-95のPDZ1とPDZ2ドメインが、Srcによる活性化の抑制にはPDZ2のみが必須であることが明らかとなった。NR1/NR2Bサブタイプ受容体では、PSD-95のPKCによる活性化抑制には、PSD-95以外のPDZドメインでも効果があり、N末端のパルミチル化部位であるシステインが必須であることが明らかとなった
4)PSD-95のGKドメインに結合するタンパク質であるGKAP (GK domain associated protein)をPSD-95とともに共発現したところNR1/NR2BとNR1/NR2C受容体に電流応答の増加がみられた。この電流応答の増加にN末のシステインが必須であった
5)NMDA受容体のサブタイプによりPSD-95,MALS-2,PSD-95/GKAP複合体による制御が異なることが示された。
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