ラットから発見された活性型L1レトロトランスポゾンの解析と応用

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14580796
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 森 政之 信州大学, 医学部, 助教授 (60273190)
• 研究分担者: 樋口 京一 信州大学, 医学部, 教授 (20173156)
• キーワード: レトロトランスポゾン / ラット / L1 / 突然変異 / Chediak-Higashi症候群 / Lyst

研究概要

ラットのlysosomal trafficking regulator(Lyst)遺伝子内に存在するL1b配列に関して以下の知見を得た。
1.DA/Ham-Lyst^<bg>とBN系ラットとの戻し交雑仔を作成し、マイクロサテライトマーカーを用いてさらに詳細な連鎖解析を行なった結果、Lyst遺伝子は第17番染色体長腕の末端付近にあるD17Rat51およびD17Rat140の近傍に位置することが明らかとなった。
ラットLyst遺伝子のイントロン内にL1配列が集積していることは、Lyst遺伝子が染色体の末端部に位置することに起因する可能性が考えられた。
2.DA/Ham-Lyst^<bg>とACI/N-Lyst^<bg-Kyo>の2系統のベージュラットがもつLyst遺伝子上の変異、および正常系統がもつ野生型対立遺伝子を容易かつ正確に識別するためのnested PCR-RFLP法を開発した。この結果、Lyst^<bg>とLyst^<bg-Kyo>は同一のL1配列間の組み換えに起因するが、その組み換え部位は対立遺伝子座間で異なることが明らかとなった。また本手法は、変異型Lyst遺伝子によるコンジェニック系統の作出や維持にも有効と考えられた。
3.serial analysis of gene expression(SAGE)法を用いて3ヶ月齢のBDF1系マウス精巣でのL1配列の発現パターンを調査した。また、老化して精巣での染色体DNAのメチル化などに乱れが生じた場合にともないL1の転写活性が変化する可能性を調査するために、29ヶ月齢のBDF1系マウス、および促進老化のモデルである14ヶ月齢のSAMP1系マウスを用いて、同様に調査を行なった。その結果、いずれの系統、月齢においてもL1配列の発現は極めて低いことが明らかとなった。

研究成果

• [文献書誌] Guo Z, Mori M, Fu X, Yao J, Xing Y, Korenaga T, Li G, Matsushita T, Hosokawa M, Higuchi K: "Amyloidosis modifier genes in less amyloidogenic A/J mouse strain"Laboratory Investigations. 83(11). 1605-1613 (2003)
• [文献書誌] Guo Z, Higuchi K, Mori M: "Spontaneous hypomorphic mutations in antioxidant enzymes of mice"Free Radical Biology and Medicine. 35(12). 1645-1652 (2003)
• [文献書誌] Masui N, Mori M, Nishikawa T, Iakagi Y, Asai H, Yanabe M, Yamasaki K, Serikawa T, Sato K: "An allele-specific genotyping method for rat Lyst (lysosomal trafficking regulator) gene"Experimental Animals. 53(1). 77-80 (2004)
• [文献書誌] Kitagawa K, Wang J, Matsushita T, Kogishi K, Hosokawa M, Fu X, Guo Z, Mori M, Higuchi K: "Polymorphisms of mouse apolipoprotein A-II : seven alleles found among 41 inbred strains of mice"Amyloid. 10(4). 207-214 (2004)
• [文献書誌] Yao J, Chiba T, Sakai J, Hirose K, Yamamoto M, Hada A, Kuramoto K, Higuchi K, Mori M: "Mouse testis transcriptome revealed using serial analysis of gene expression"Mammalian Genome. 印刷中. (2004)