| 研究概要 |
腫瘍やガン細胞株にはFas, FADD, Caspase8を発現しているにもかかわらずFasを介する細胞死に対し強い抵抗性を示すものがある。従来、このような細胞ではFLIPがDISCの形成を競合阻害し、結果的に細胞死に対して抵抗性を示すと考えられてきた。Caspase8はDISC内で自己触媒的な活性化により切断さるが、FLIPはCaspase8と競合することによりCaspase8とFADDの会合を阻害することでCaspase8の活性化を抑制する。FLIPは元々アポプトーシスを抑制する分子として報告されたが、近年、FLIPはアポプトーシスを促進する機能も有するという論文も複数報告されている。我々はFas非感受性の腫瘍細胞株に低濃度のCychloheximideを同時に与えると細胞死に強い感受性を示すようになり、細胞死感受性の細胞株では感受性がさらに高まることを見出した。このような細胞株ではFLIPの有意な発現は認められず、感受性の変化とFLIPの発現量にも相関関係は観察されなかった。
次にFLIPの切断に注目し、その切断がFLIPの細胞死制御にどのようにかかわっているのか調べた。FLIPの野生型とDN変異型をHeLa細胞に導入し、恒常的に発現する細胞株を樹立して解析を行った。得られた細胞株にFasを介する細胞死を誘導したところ、野生型のFLIPはp10サブユニットの生成が観察されたが、変異型のFLIP DNは全く切断されなかった。さらに変異型のFLIP DNは野生型のFLIPと比べて、僅かな発現量でもFas誘導アポプトーシスを効率よく抑制できることが分かった。このことはFLIPの切断がCaspase8の活性化を促進することを示唆する。我々の実験結果は生理的なレベルの発現量においてもc-FLIPはCaspase8の活性化に関わることを強く示唆する。今後、Caspase8の活性化におけるc-FLIPの機能をさらに解析していきたい。
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