2002 年度実績報告書

細胞内寄生菌弱毒株を抗原定示細胞への運搬ベクターとする経口DNAワクチンの開発:健康豚下顎リンパ節から分離されるロドコッカス・エクイ中等度毒力株の応用

研究課題

研究課題/領域番号	14656124
研究機関	北里大学
研究代表者	高井伸二北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (80137900)
研究分担者	斑目広郎麻布大学, 獣医学部, 助教授 (20173768) 椿志郎北里大学, 獣医畜産学部, 教授 (70050507) 角田勤北里大学, 獣医畜産学部, 助手 (80317057)
キーワード	ロドコッカス・エクイ / 病原性プラスミド / DNAワクチン / 病原性 / 弱毒株 / 細胞内寄生菌 / 豚 / 抗原提示細胞
研究概要	細胞内寄生菌弱毒株を用いたDNAワクチン運搬システムは高い安定性、安い生産コスト、投与技術の簡便さの点から、家畜の次世代ワクチンとして極めて有望である。本研究の目的は、免疫応答の場であるリンパ節に寄生するロドコッカス・エクイ中等度毒力株をDNAワクチンの免疫系(樹状細胞)への効率的な運搬ペクターとして利用可能であるか否かを検討し、経口ワクチンとして家畜の次世代ワクチンの可能性を探ることである。平成14年度の研究では、このシャトルベクターに真核細胞内で抗原を産生するための遺伝子構築(強力なプロモーターとポリA)を加えた、ロドコッカス・エクイ用のDNAワクチンベクターを作り、中等度毒力株の形質転換株を作出する目的のために、ロドコッカス・エクイの潜在プラスミドをシャトルベクターの一部とするために、このプラスミドの選定とその全塩基配列の決定を行った。E.coli-R.equi間のシャトルベクターを作製するにあたって、R.equiにおいて機能するRepliconとして使用するK56株の潜在性プラスミドの複製機構やその制限酵素地図等の情報を得る必要性からpK56の全塩基配列の決定を試みた。その結果、K56株は当初解析を予定していた約6kbpのプラスミド以外に約1kbpのプラスミドも有していることがアガロースゲル電気泳動像から明らかとなった。そこで6kbpと1kbpのプラスミドをそれぞれpK56-1、ならびにpK56-2とした。これらをショットガンクローニングし、プラスミドDNA断片の塩基配列の決定を行ったところ、最終的にpK56-1とpK56-2のサイズはそれぞれ6,436bpと1,213bpであることが明らかとなった。現在、このプラスミドを用いてペクター構築中である。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Takai, S., et al.: "Identification of virulence-associated antigens and plasmids in Rhodococcus equi from AIDS patients and prevalence of virulent R. equi in soil collected from domestic animal farms in Chiang Mai"Am.J.Trop.Med.Hyg.. 66(1). 52-55 (2002)
[文献書誌] Cuteri V, Takai S, et al.: "Detection of antibodies against Rhodococcus equi in Alpaca (Lama pacos) in Italy"Eur.J.Epidemiol.. 17(11). 1043-1045 (2002)
[文献書誌] Yuyama, T., et al.: "Molecular epidemiology of virulent Rhodococcus equi in thoroughbred horses in Kagoshima"J.Vet.Med.Sci.. 64(8). 715-718 (2002)
[文献書誌] Martens RJ, et al.: "Evaluation of 5 serologic assays to detect Rhodococcus equi pneumonia in foals"J.Am.Vet.Med.Assoc.. 221(6). 825-833 (2002)
[文献書誌] Makrai L, Takai S, et al.: "Characterization of virulence plasmid types in Rhodococcus equi isolates from foals, pigs, humans and soil in Hungary"Vet.Microbiol.. 88(4). 377-384 (2002)
[文献書誌] Takai, S., et al.: "Isotype-specific antibody responses to Rhodococcus equi in foals on a horse-breeding farm with a persistent incidence of R.equi infection"J.Equine Sci.. 13(2). 63-70 (2002)

2002 年度 実績報告書

細胞内寄生菌弱毒株を抗原定示細胞への運搬ベクターとする経口DNAワクチンの開発:健康豚下顎リンパ節から分離されるロドコッカス・エクイ中等度毒力株の応用

研究代表者

高井 伸二 北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (80137900)

研究成果

[文献書誌] Takai, S., et al.: "Identification of virulence-associated antigens and plasmids in Rhodococcus equi from AIDS patients and prevalence of virulent R. equi in soil collected from domestic animal farms in Chiang Mai"Am.J.Trop.Med.Hyg.. 66(1). 52-55 (2002)

[文献書誌] Cuteri V, Takai S, et al.: "Detection of antibodies against Rhodococcus equi in Alpaca (Lama pacos) in Italy"Eur.J.Epidemiol.. 17(11). 1043-1045 (2002)

[文献書誌] Yuyama, T., et al.: "Molecular epidemiology of virulent Rhodococcus equi in thoroughbred horses in Kagoshima"J.Vet.Med.Sci.. 64(8). 715-718 (2002)

[文献書誌] Martens RJ, et al.: "Evaluation of 5 serologic assays to detect Rhodococcus equi pneumonia in foals"J.Am.Vet.Med.Assoc.. 221(6). 825-833 (2002)

[文献書誌] Makrai L, Takai S, et al.: "Characterization of virulence plasmid types in Rhodococcus equi isolates from foals, pigs, humans and soil in Hungary"Vet.Microbiol.. 88(4). 377-384 (2002)

[文献書誌] Takai, S., et al.: "Isotype-specific antibody responses to Rhodococcus equi in foals on a horse-breeding farm with a persistent incidence of R.equi infection"J.Equine Sci.. 13(2). 63-70 (2002)

2002 年度実績報告書

高井伸二北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (80137900)