心血管特異的薬剤誘導型遺伝子改変マウスの開発

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14657163
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 永井 良三 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (60207975)
• 研究分担者: 廣井 透雄 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (30311624) ; 前村 浩二 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (90282649)
• キーワード: 組織特異的遺伝子改変マウス / 動脈硬化 / 心肥大 / 転写因子 / 組織リモデリング / 生活習慣病 / 増殖因子 / Creリコンビナーゼ

研究概要

本研究は心血管系での遺伝子の機能を個体レベル、in vivoで解析するための、時間的空間的に制御可能な新しい一連の遺伝子改変マウスの開発を目的とする。血管内皮細胞に対してTie2遺伝子プロモーター、心筋細胞に対して心筋αミオシン重鎖遺伝子プロモーター、平滑筋細胞に対して平滑筋ミオシン重鎖プロモーターを用い、これらのプロモーターによってCre遺伝子の発現が制御されるコンストラクトを作成し、トランスジェニックマウスを作成した。Creの発現をin vivoでモニターするために、Rosa-stop-LacZマウスとこれら心血管細胞特異的Cre発現マウスを交配した。また、薬剤によってCreの機能を制御するためにCreとエストロジェン受容体の複合蛋白をコードするコンストラクトを作成し、細胞レベルでタモキシフェンによって遺伝子組み換えが誘導されることを確認した。このCre-ER遺伝子をCAGプロモーターに結合し、全組織でCre-ERを発現するトランスジェニックマウスを作成した。CreおよびCre-ERのマウスと掛け合わせるマウスに関して、KLF5遺伝子にloxPをノックインしたマウス(floxed mouse)の作成を開始した。また、Cre存在下で遺伝子を強制発現するためのコンストラクトを作成し、KLF5遺伝子を組み込み、トランスジェニックマウスを作成した。このように、今後の研究のために必須なマウスの作成を進めた。

研究成果

• [文献書誌] Shindo, T.: "Kruppel-like zinc-finger transcription factor KLF5/BTEB2 is a target for angiotensin II signaling and an essential regulator of cardiovascular remodeling"Nature Medicine. 8・8. 856-863 (2002)
• [文献書誌] Manabe I: "Gene Expression in Fibroblasts and Fibrosis : Involvement in Cardiac Hypertrophy"Circulation Research. 91・12. 1103-1113 (2002)
• [文献書誌] Sata, M.: "Hematopoietic stem cells differentiate into vascular cells that participate in the pathogenesis of atherosclerosis"Nature Medicine. 8・4. 403-409 (2002)
• [文献書誌] Nishimatsu H: "Role of endogenous adrenomedullin in the regulation of vascular tone and ischemic renal injury : studies on transgenic/knockout mice of adrenomedullin gene"Circulation Research. 90・6. 657-663 (2002)
• [文献書誌] Ishizaka N: "Iron overload augments angiotensin II-induced cardiac fibrosis and promotes neointima formation"Circulation. 106・14. 1840-1846 (2002)
• [文献書誌] Maemura K: "Novel Insight into the Role of Endothelial PAS Domain Protein 1 in Congestive Heart Failure"Journal of Molecular Cellular Cardiology. 34・7. 703-707 (2002)