抗CD40Lモノクローナル抗体を用いた新しい免疫抑制療法の開発

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14657203
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 高江 雄二郎 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00306367)
• 研究分担者: 谷川 瑛子 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (00203117) ; 天谷 雅行 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563) ; 西川 武二 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579) ; 永尾 圭介 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (40286521) ; 斎藤 京 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50286548)
• キーワード: CD40L / CD156 / 自己免疫 / 自己抗体 / 天疱瘡 / モデルマウス / 免疫抑制療法

研究概要

本研究の目的は、我々が開発した天疱瘡モデルマウスを用いて、抗CD40L抗体の予防的、治療的効果を判定し、抗CD40L抗体の臨床的応用を目指した基礎実験を行うことである。CD40-CD40L阻害による自己免疫反応抑制は皮膚科領域の疾患の中で評価されたことがなく、抗CD40L抗体の効果を評価し、その免疫抑制作用機序を解析することにより、臨床に還元できる新たな特異的免疫抑制療法の開発につながる。
平成14年度は、発症前の天疱瘡モデルマウスに抗マウスCD40Lモノクローナル抗体(以下MR1)を投与し、MR1の予防的効果を評価した。MR1を投与したマウスはコントロールに比して、形態学的には体重減少を認めず、脱毛・びらんを生じなかった。病理組織学的には、硬口蓋より採取した口腔粘膜組織のHematoxylin-Eosin染色および蛍光染色を行ったが、天疱瘡に特徴的な水疱形成を認めず、表皮細胞間に抗体の沈着を認めなかった。また組換えDsg3を抗原として用いたELISA法にてもDsg3に対する抗体価の上昇を認めず、ELISPOT法にて抗Dsg3抗体生産B細胞数を計測したが、脾臓・骨髄・リンパ節の全てにおいて有意に減少していた。Dsg3に対する免疫寛容を獲得していないDsg3-/-マウス由来の脾細胞(T細胞、B細胞)を移植すると、レシピエントマウス内において内因性のDsg3と出会い、Dsg3に対するIgG抗体を持続的に産生することになるが、以上の結果よりMR1はCD40-CD40L阻害により天疱瘡の発症を予防することが示された。
平成15年度は、既に発症した天疱瘡モデルマウスにMR1を投与し、その治療効果を評価する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Tsunoda K, Ota T, Aoki M, Ymada T, Nagai T, Nakagawa T, Koyasu S, Nishikawa T, Amagai M: "Induction of pemphigus phenotype by a mouse monoclonal antibody against the amino-terminal adhesive interface of desmoglein 3"J Immunol. 170. 2170-2178 (2003)
• [文献書誌] Kobayashi M, Amagai M, Kuroda-Kinoshita K, Hashimoto T, Shirakata Y, Hashimoto K, Nishikawa T: "BP180 ELISA using bacterial recombinant NC16a protein as a diagnostic and monitoring tool for bullous pemphigoid"J Dermatol Sci. 30. 224-232 (2002)
• [文献書誌] Cheng SW, Kobayashi M, Kinoshita-Kuroda K, Tanikawa A, Amagai M, Nishikawa T: "Monitoring disease activity in pemphigus with enzyme-linked immunosorbent assay using recombinant desmogleins 1 and 3"Br J Dermatol. 147. 261-265 (2002)
• [文献書誌] Ohyama M, Amagai M, Tsunoda K, Ota T, Koyasu S, Hata J, Umezawa A, Nishikawa T: "Immunologic and histopathologic characterization of an active disease mouse model for pemphigus vulgaris"J Invest Dermatol. 118. 199-204 (2002)
• [文献書誌] Tsunoda K, Ota T, Suzuki H, Ohyama M, Nagai T, Nishikawa T, Amagai M, Koyasu S.: "Athogenic autoantibody production requires loss of tolerance against desmoglein 3 in both T and B cells in experimental pemphigus vulgaris"Eur J Immunol. 32. 627-633 (2002)