2003 年度実績報告書

発生工学的手法を用いた白血病関連転写因子TELの機能解析

研究課題

研究課題/領域番号	14657248
研究機関	獨協医科大学
研究代表者	三谷絹子獨協医科大学, 医学部, 教授 (50251244)
研究分担者	牧和宏獨協医科大学, 医学部, 助手 (50337391) 佐々木光獨協医科大学, 医学部, 助手 (60282638) 和賀一雄獨協医科大学, 医学部, 講師 (00285917)
キーワード	TEL / トランスジェニックマウス / ノックアウトマウス / コンディショナルマウス / ES / Creリコンビナーゼ / Lox-P配列
研究概要	1.TELトランスジェニックマウスの作製:TEL及びそのドミナント・ネガティブ体であるHLH (helix-loop-helix)欠失変異体ΔHLHをGATA-1プロモーター下に発現するトランスジェニックマウスを作製した。今後F1個体について、血算、骨髄の形態観察、各種サイトカインを用いた液体培養系での分化誘導実験、コロニー形成実験を行う予定である。さらに、TELは赤芽球分化を促進すると考えられるので、脱血及び低酸素状態のストレス下での赤芽球造血の評価を行う。 2.TELノックアウトマウスの作製:マウスTEL遺伝子の第6エクソン〜第8エクソンの一部をneomycin耐性遺伝子およびIRES-GFP遺伝子で置き換えたターゲッティングベクターを構築した。現在相同組み換えES細胞をクローニング中である。ヘテロマウスを用いてGFPを指標に胎生期のTELの発現部位を明らかにするとともに、ノックアウトマウスを用い胎生致死のレスキュー実験を行う。 3.TELコンディショナルマウスの作製:マウスTEL遺伝子の第6エクソンの両端とそれに続くneomycin耐性遺伝子の端にLox-P配列を挿入したターゲッティングベクターを作製し、ES細胞に遺伝子導入し相同組み換え体を得る方針である。さらに、この相同組み換え体にpMC1-Creベクターを導入し、Lox-P配列を挟む領域を欠失させる。neomycin耐性遺伝子のみを削った(I型欠失)相同組み換えES細胞、第6エクソンとneomycin耐性遺伝子を削った(II型欠失)相同組み換えES細胞を用いてキメラマウスの作製を行い、さらに交配によりヘテロマウス(I型欠失-TELflox/WT、II型欠失-TELΔ/WT)を得る。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Waga, K.: "Leukemia-related transcription factor TEL accelerates differentiation of Friend erythroleukemia cells."Oncogene. 22. 59-68 (2003)
[文献書誌] Qiao, Y.: "Identification of a novel fusion gene, TTL, fused to ETV6 in acute lymphoblastic leukemia with t(12;13)(p13;ql4), and its implication in leukemogenesis."Leukemia. 17. 1112-1120 (2003)
[文献書誌] Imai, Y.: "The corepressor mSin3A regulates phosphorylation-induced activation, intranuclear location, and stability of AML1."Mol.Cell.Biol.. 24. 1033-1043 (2003)
[文献書誌] Maki, K.: "Leukemia-related transcription factor TEL is negatively regulated through ERK-induced phosphorylation."Mol.Cell.Biol.. (in press).
[文献書誌] Yamaguchi, Y.: "AML1 is functionally regulated through p300-mediated acetylation on specific lysine residues."J Biol Chem.. (in press).
[文献書誌] Ichikawa, M.: "AML-1 is required for megakaryocytic maturation and lymphocytic differentiation, but not for maintenance of hematopoietic stem cells in adult hematopoiesis."Nat Med.. (in press).

2003 年度 実績報告書

発生工学的手法を用いた白血病関連転写因子TELの機能解析

研究代表者

三谷 絹子 獨協医科大学, 医学部, 教授 (50251244)

研究成果

[文献書誌] Waga, K.: "Leukemia-related transcription factor TEL accelerates differentiation of Friend erythroleukemia cells."Oncogene. 22. 59-68 (2003)

[文献書誌] Qiao, Y.: "Identification of a novel fusion gene, TTL, fused to ETV6 in acute lymphoblastic leukemia with t(12;13)(p13;ql4), and its implication in leukemogenesis."Leukemia. 17. 1112-1120 (2003)

[文献書誌] Imai, Y.: "The corepressor mSin3A regulates phosphorylation-induced activation, intranuclear location, and stability of AML1."Mol.Cell.Biol.. 24. 1033-1043 (2003)

[文献書誌] Maki, K.: "Leukemia-related transcription factor TEL is negatively regulated through ERK-induced phosphorylation."Mol.Cell.Biol.. (in press).

[文献書誌] Yamaguchi, Y.: "AML1 is functionally regulated through p300-mediated acetylation on specific lysine residues."J Biol Chem.. (in press).

[文献書誌] Ichikawa, M.: "AML-1 is required for megakaryocytic maturation and lymphocytic differentiation, but not for maintenance of hematopoietic stem cells in adult hematopoiesis."Nat Med.. (in press).

2003 年度実績報告書

三谷絹子獨協医科大学, 医学部, 教授 (50251244)