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胚性幹(ES)細胞の分化制御による再生医療に関する基礎的研究
全能性を持つ胚性幹細胞(embryonic stem cell : ES細胞)の肝細胞への分化誘導法を検討し、細胞移植等に必要な規格化された安全性の高い肝細胞を人為的・恒常的・工業的に大量に供給可能とし、肝臓の再生治療法を確立することを目的として研究を行った。初期目標として、肝実質細胞へ分化の方向性が決定された肝幹細胞(hepatic stem cell)を、ES由来細胞群の中からFACS (fluorescence activated cell sorter)を用いた精度の高い細胞分離法により特異的に選別・回収する方法論の確立を試みた。ES細胞をLIF (leukemia inhibitory factor)の非存在下に培養し、内胚葉系細胞の特異的マーカーであるHNF (hepatocyte specific nuclear factor)3、HNF4、albumin、alpha-fetoproteinの発現を定量的RT-PCRにより解析したところ、培養14日目以降に肝細胞マーカーの発現が上昇することを確認した。また、これらの分化マーカーの発現は胚様体の接着培養系において、より効率よく誘導されることを明らかにした。
来年度の研究では、この肝細胞へ分化しつつある細胞群を選択的に回収するために、FACSによる細胞分離法を用いた研究を計画する。
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