| 研究概要 |
・正常ヒトアストロサイトの培養系を用い,オピオイドペプチドLVV-hemorphin-7 (LH7)刺激によるアストロサイトにおけるplasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1)の発現をさらに検討した。昨年度の逆転写PCR (RT-PCR)法及び酵素免疫(ELISA)法による検討に加え,定量PCR (real-time PCR)法によるmRNA発現の解析を行った。この方法においてもLH7刺激アストロサイトにおけるPAI-1 mRNA発現の誘導を確認した。また,アンギオテンシンIV受容体に対する拮抗阻害薬Nle^1,Leu^3-angiotensin IV,並びに,安定な作動薬Nle^1-angiotensin IVを用いた刺激実験を行い,LH7の作用がはたしてアンギオテンシンIV受容体を介するか否かについて検討した。しかし,肯定的な結果は得られていない。LH7はアストロサイトのPAI-1分泌を高め,脳内細胞外基質の再構成に寄与している可能性があると考えられたが,その作用機序の解明は今後の検討課題である。
・LH7刺激アストロサイトにおけるPAI-1以外の遺伝子発現をRT-PCR法及びreal-time PCR法により検討した。細胞間接着分子(ICAM-1),神経成長因子(NGF)及び血管内皮増殖因子(VEGF)についてmRNAの発現誘導が認められた。今後,これらの遺伝子のタンパク質レベルでの発現検討を行う。また,虚血を想定した低酸素の影響や腫瘍細胞株U251における発現について検討を進める予定である。
・これに先立ち条件検討を進めていた低酸素培養正常ヒトアストロサイトにおけるVEGF発現に関する成果をまとめた(International Congress Series 2003;1251:81-6)。
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