2002 年度実績報告書

卵巣表層上皮をもちいた上皮性卵巣癌発生過程に関与する因子の同定・解析

研究課題

研究課題/領域番号	14657420
研究機関	京都大学
研究代表者	藤井信吾京都大学, 医学研究科, 教授 (30135579)
研究分担者	刈谷方俊京都大学, 医学研究科, 講師 (90243013) 高倉賢二京都大学, 医学研究科, 助教授 (10221350)
キーワード	上皮性卵巣癌 / hTERT / mutant Ha-ras / c-erbB-2 / 不死化 / 卵巣表層上皮細胞 / 不死化細胞株 / 癌化細胞株
研究概要	【目的】予後不良例が多いために臨床的に大きな問題である上皮性卵巣癌の発癌機序の分子レベルでの解析をめざした。本研究ではまず卵巣癌との関連が示唆される遺伝子を、発生母地とされる卵巣表層上皮(OSE)細胞に遺伝子導入して癌化を誘導し、発癌モデルの確立を試みた。【方法及び結果】培養OSE細胞にSV40largeT抗原(LT)、テロメラーゼ活性を誘導するhTERT、癌遺伝子であるmutant Ha-rasまたはc-erbB-2各遺伝子をリポフェクション法にて導入し、クローニングした。各遺伝子の発現はWestern blotting法等にて確認した。LT、hTERTの導入によりOSE細胞は100代以上の継代が可能となり不死化した。しかしこの細胞はマウスでの腫瘍形成は示さなかった。この不死化OSE細胞にmutant Ha-rasまたはc-erbB-2を導入すると、軟寒天培地中での足場非依存性増殖能が亢進し、さらにBALB/Cヌードマウス皮下ないしBALB/C SClDマウス腹腔内注入にて腫瘍形成を認め、悪性転化したことが確認された。形態学的には未分化な上皮性腫瘍であったが、1例、分化した上皮様形態を示した。この1例は卵巣癌腫瘍マーカーCA125の発現も示した。次に癌化していない不死化細胞と癌化細胞における遺伝子発現の差異をmicroarray法で解析し、これまで卵巣癌との関連が報告されていない、複数の新しい遺伝子の発現異常を見い出した。【結論及び本研究の意義】ras、c-erbB-2癌遺伝子が卵巣癌の発癌過程に関与することが示唆された。また卵巣表層上皮細胞の不死化細胞株、癌化細胞株を確立した。この細胞株のmicroarray法による解析で見い出した遺伝子異常をさらに検討中であるが、この細胞株は他にも応用範囲が広く、今後の卵巣癌発癌過程の解析に貢献しうるものと考えられる。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Fukuhara K, et al.: "Secreted frizzled related protein 1 is overexpressed in uterine leiomyomas, associated with a high estrogenic environment and unrelated to proliferative activity"J Clin Endocrinol Metab. 87. 1729-1736 (2002)
[文献書誌] Shime H, et al.: "Tranilast Inhibits the Proliferation of Uterine Leiomyoma Cells in Vitro through G1 Arrest Associated with the Induction of p21 (waf1) and p53"J Clin Endocrinol Metab. 87. 5610-5617 (2002)
[文献書誌] Orii A: "Altered post-translational modification of redox factor 1 protein in human uterine smooth muscle tumors"J Clin Endocrinol Metab. 87. 3754-3759 (2002)
[文献書誌] Hamid AA: "Cyclical change of hMSH2 protein expression in normal endometrium during the menstrual cycle and its overexpression in endometrial hyperplasia and sporadic endometrial carcinoma"Cancer. 94. 997-1005 (2002)
[文献書誌] Higashitsuji Hisako, et al.: "A novel protein expressed in hepatoma accelerates export of NF-kB from the nucleus and inhibits p53-dependent apoptosis"Cancer Cell. 2. 532-537 (2002)
[文献書誌] Kuragaki C: "Mutations in the STK11 Gene Characterize Minimal Deviation Adenocarcinoma of the Uterine Cervix"Lab Invest.. 83. 35-45 (2003)

2002 年度 実績報告書

卵巣表層上皮をもちいた上皮性卵巣癌発生過程に関与する因子の同定・解析

研究代表者

藤井 信吾 京都大学, 医学研究科, 教授 (30135579)

研究成果

[文献書誌] Fukuhara K, et al.: "Secreted frizzled related protein 1 is overexpressed in uterine leiomyomas, associated with a high estrogenic environment and unrelated to proliferative activity"J Clin Endocrinol Metab. 87. 1729-1736 (2002)

[文献書誌] Shime H, et al.: "Tranilast Inhibits the Proliferation of Uterine Leiomyoma Cells in Vitro through G1 Arrest Associated with the Induction of p21 (waf1) and p53"J Clin Endocrinol Metab. 87. 5610-5617 (2002)

[文献書誌] Orii A: "Altered post-translational modification of redox factor 1 protein in human uterine smooth muscle tumors"J Clin Endocrinol Metab. 87. 3754-3759 (2002)

[文献書誌] Hamid AA: "Cyclical change of hMSH2 protein expression in normal endometrium during the menstrual cycle and its overexpression in endometrial hyperplasia and sporadic endometrial carcinoma"Cancer. 94. 997-1005 (2002)

[文献書誌] Higashitsuji Hisako, et al.: "A novel protein expressed in hepatoma accelerates export of NF-kB from the nucleus and inhibits p53-dependent apoptosis"Cancer Cell. 2. 532-537 (2002)

[文献書誌] Kuragaki C: "Mutations in the STK11 Gene Characterize Minimal Deviation Adenocarcinoma of the Uterine Cervix"Lab Invest.. 83. 35-45 (2003)

2002 年度実績報告書

藤井信吾京都大学, 医学研究科, 教授 (30135579)