ステロイド産生細胞特異的ミトコンドリア酸性タンパク(StAMP)の機能解明

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14657428
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 吉村 泰典 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736)
• 研究分担者: 宮越 敬 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (70265883) ; 田中 守 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (20207145)
• キーワード: StAMP / ミトコンドリア / Ad4BP / SF-1

研究概要

本年度の研究では、以下の検討をおこなった。
1,StAMPの発現調節機構
種々の長さのStAMPゲノムDNAの5末端非翻訳領域を、ルシフェラーゼ産生能を有するレポーターベクターに組み込み、ステロイドホルモン産生・非産生細胞にトランスフェクションし、ルミノメーターでルシフェラーゼ活性を測定した。その結果、Ad4BP/SF-1結合可能領域を欠如するレポーターベクターでは、ルシフェラーゼ活性が有意に低下し、Ad4BP/SF-1がStAMPの発現調節を行っている可能性が示唆された。さらに、In vitroでAd4BP/SF-1のpromoter bindingを検索するためにgel shift assayを行うためのDNAおよびリコンビナント蛋白を作成した。
2,StAMPのミトコンドリア局在シグナルの研究
本年度は、StAMPのミトコンドリア局在シグナルを検討するためにGFP結合StAMP蛋白を3T3細胞内に発現させ、ミトコンドリアに局在していることを確認することが確認された。現在、種々のStAMP蛋白の部分を欠如させたGFP結合蛋白を作成し、ミトコンドリア局在シグナルの検討を行っている。
3,Ad4BP/SF-1とStAMP蛋白との局在の比較
種々のマウス組織切片を使用し、Ad4BP/SF-1蛋白が発現している部位でのStAMP蛋白の局在を検討した。その結果、StAMP蛋白は、脳内で下垂体、副腎皮質の全層、脾臓の類洞内皮細胞、精巣のLeydig cell、また、マウス胎児の副腎原器発現していることが明らかとなり、これまで知られているAd4BP/SF-1の発現部位と完全に一致した。現在、マウス胎児性腺発達における発現につき検討を行っている。

研究成果

• [文献書誌] Ozawa N, Goda N, Makino N, Yamaguchi T, Yoshimura Y, Suematsu M: "Leydigcell-derived heme oxygenase-1 regulates apoptosis of premeiotic germ in response to stress"J Clin Invest. 109. 45467 (2002)
• [文献書誌] Yoshimura Y: "The role of integrins in the human reproductive process"J Reprod Dev. 48. 215-232 (2002)
• [文献書誌] Tanaka M, Teranishi T, Miyakoshi K, Jiaxue W, Ueno K, Matsumoto T, Hattori Y, Yoshimura Y: "Oocyte-specific linker histone in mammalian species"J Mamm Ova Res. 19. 61-65 (2002)
• [文献書誌] Kashiwagi S, Kajimura M, Yoshimura Y, Suematsu M: "Nonendothelial source of nitric oxide in arterioles but not in venules"Cir Res. 91. e55-e64 (2002)
• [文献書誌] Shiokawa S, Iwashita M, Akimoto Y, Nagamatsu S, Nakamura Y, Uehata M, Yoshimura Y: "Small guanosine triphospatase RhoA and Rho-associated kinase as regulators of trophoblast migration"J Clin Endocrinol Metab. 87. 5808-5816 (2002)
• [文献書誌] Minegishi K, Tanaka M, Nishimura O, Tanigaki S, Miyakoshi K, Ishimoto H, Yoshimura Y: "Reactive oxygen species mediate leukocyte-endothelium interactions in prostaglandin F2a-induced luteolysis in rats"Am J Physiol. 283. E1308-E1315 (2002)