免疫担当細胞におけるプリオン蛋白質の作用機構に関する研究

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14704017
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 佐伯 圭一 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (10311630)
• キーワード: プリオン蛋白質 / プリオン / スクレイピー / T細胞 / B細胞 / マクロファージ / アポトーシス

研究概要

本年度新たにプリシナー博士より分与されたプリオン蛋白質(PrP)遺伝子ノックアウトマウス(Zn-1型)と従来本研究にて使用してきたPrP遺伝子ノックアウトマウス(Rikn型)を用いてPrPの正常機能について研究を行なった。PrP野生型マウスより得られた腹腔浸出マクロファージとの比較において両PrP遺伝子ノックアウトマウスより得られた腹腔浸出マクロファージは貧食能が低下している傾向にあった。また、無血清培地下での培養によってPrP野生型マウス由来腹腔浸出マクロファージと比較してPrP遺伝子ノックアウトマウス由来腹腔浸出マクロファージは生存能が低下していた。
両PrP遺伝子ノックアウトマウスとPrP野生型マウスそれぞれの脾臓から調製した脾細胞を用いて、ConA、LPS、PMA刺激による細胞の活性化について解析を行なったところ、PrP遺伝子ノックアウトマウス由来脾細胞はPrP野生型マウス由来脾細胞と比較して活性化増殖能が低かった。また、アポトーシス細胞の出現率についてもPrP遺伝子ノックアウトマウス由来脾細胞はPrP野生型マウス由来脾細胞と比較して高い結果が得られた。以前PrP欠損神経細胞株は、無血清培養下においてアポトーシスを起こすが、PrPの再発現化によりアポトーシスが抑制されることを報告した。今回得られて結果はマクロファージや脾細胞が活性化にともなって、生存維持のためにPrPを発現しアポトーシス抵抗性を獲得していることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] 佐伯 圭一: "動物のプリオン病"最新医学. 58・5. 1008-1013 (2003)
• [文献書誌] Kubosaki, A: "Expression of normal prion protein(PrP) on T lymphocytes and the effect of copper ion : analysis by wild-type and prion gene-deficient mice."Biochem.Biophys.Res.Comm.. 307・4. 810-813 (2003)
• [文献書誌] Sakudo, A: "Absence of superoxide dismutase activity in a soluble isoform of prion protein produce by baculovirus expression system."Biochem.Biophys.Res.Comm.. 307・3. 678-683 (2003)
• [文献書誌] Sakudo, A: "Impairment of superoxide dismutase activation by N-terminally truncated prion protein(PrP) in PrP-deficient neuronal cell line."Biochem.Biophys.Res.Comm.. 308・3. 660-667 (2003)
• [文献書誌] Sakudo, A: "Tumor necrosis factor attenuates prion protein-deficient neuronal cell death by increases in anti-apoptotic Bcl-2 family proteins."Biochem.Biophys.Res.Comm.. 310・3. 725-729 (2003)
• [文献書誌] Nakamura, Y: "Transfection of prion protein gene suppresses coxsackievirus B3 repliction in prion protein gene-deficient cells."J.Gen.Virol.. 84・12. 3495-3502 (2003)