| 研究概要 |
虚血-再潅流時における膀胱平滑筋の機能と、一酸化窒素(NO)の役割、アポトーシスの経時的な関係、シクロヘキサノン誘導体(C-1)の予防効果とHSP70-1/-2mRNAの発現について若干の知見を得た。8週齢の雄Wistarラットの大動脈分岐部直上を血管クリップでクランプし、これをはずすことで膀胱の虚血-再灌流モデルを作製した。ラット膀胱の虚血時間を30分とし、様々な再潅流時間で膀胱を摘出した.この膀胱を用いて、恒温槽を用いた機能実験(カルバコール、KClに対する反応)および、H&E染色、TUNEL染色を行った。一酸化窒素合成酵素(NOS)阻害剤の作用を調べるため、L-NAME30mg/kgを虚血30分前に腹腔内投与する群を作成し、同様の実験を行った。ラットの虚血30分前に0,0.5,2,8mg/kgのC-1を腹腔内投与した。各群の摘出した膀胱頂部の筋切片を作成し、恒温槽を用いてカルバコールに対する反応を調べた。また、この膀胱のHSP70-1/-2mRNAの発現をリアルタイムPCR法を用いて定量した。機能実験では虚血時間を30分に設定すると再灌流30分にてその傷害は増強されたが、この障害はL-NAMEで予防できた。再灌流3日で膀胱収縮力は改善し、7日後は膀胱平滑筋の障害は再灌流30分に比べ優位に回復したがNO合成阻害剤の投与のよりコントロールのレベルまで回復した。TUNEL陽性細胞は虚血-再潅流3日後にもっとも多く観察された。このアポトーシスの誘導は、L-NAMEにて阻害された。シクロヘキサノン誘導体は、膀胱の虚血-再潅流障害を用量依存的に予防した。膀胱に対しても抗酸化作用があり、虚血-再潅流障害に対し予防効果が示唆された。HSP70-1/-2のmRNAの発現は、コントロール時より検出された。虚血30分でコントロールと比べ優位に上昇した。再潅流30分で一時的にコントロールのレベルまで低下したが、再潅流60分では、コントロールや虚血30分時に比べて優位に増加した。
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