2002 年度実績報告書

ユビキチン様蛋白質修飾システムによる生体機能制御

研究課題

研究課題/領域番号	14704069
研究機関	(財)東京都医学研究機構
研究代表者	千葉智樹財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)
キーワード	ユビキチン / ユビキチン様タンパク質 / プロテアソーム / オートファジー / 品質管理
研究概要	I型に属するユビキチン様蛋白質はユビキチンシステムと類似した独自の酵素系で標的蛋白質に共有結合する.ユビキチンと最も相同性の高いRub1/NEDD8はCullinファミリー蛋白を修飾し,そのユビキチンリガーゼ活性を促進する.その生理学的意義を明らかにする目的で,NEDD8のE1様酵素であるUba3のノックアウトマウスを作製した.Uba3欠損マウスは早期胎生致死であり,NEDD8修飾系はホ乳動物の細胞周期制御や形態形成シグナルの制御に必須であることが判明した.本年度はさらにコンディショナルノックアウトマウスの作製を行っている.次にオートファジー経路に必須であるユビキチン様のAPG修飾系についても,そのE1様酵素であるAPG7のコンディショナルノックアウトマウスとE2様酵素APG3のノックアウトマウスを作製した.これらの表現型は現在解析中である.これらの成果に加えて,本年度は,(1)プロテアソームサブユニットZのコンディショナルノックアウト細胞を作製し,プロテアソーム依存性タンパク質分解の生理的意義を解析した.また,(2)Fbx2がN型糖鎖を認識するF-box蛋白質であり,小胞体関連蛋白質分解に関与するユビキチンリガーゼであることを明らかにした.そして(3)脱ユビキチン化酵素UBP69とUBP45がmRNAの選択的スプライシングによって合成され,その発現制御が筋分化を制御することを明らかにした.最後に,(4)プロテアソーム活性化因子PA28のノックアウトマウスを用いて,Hsp9OがPA28非依存性の抗原提示に必須であることを明らかにした.

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Tanahashi-Hori T., Tanahashi N., Tanaka K, Chiba T.: "Conditional knockdown of proteasomes results in cell-cycle arrest and enhanced expression of molecular chaperones Hsp70 and Hsp40 in chicken DT40 cells"J.Biol.Chem.. 278(in press). (2003)
[文献書誌] Yoshida Y, Chiba T, Tokunaga F, Kawasaki H, Iwai K, Suzuki T, Ito Y, Matsuoka K, Yoshida M, Tanaka K, Tai T.: "E3 ubiquitin ligase that recognizes sugar chains"Nature. 418. 438-442 (2002)
[文献書誌] Park KC, Kim JH, Choi EJ, Min SW, Rhee S, Baek SH, Chung SS, Bang O, Park D, Chiba T, Tanaka K, Chung CH: "Antagonistic regulation of myogenesis by two deubiquitinating enzymes, UBP45 and UBP69"Proc Natl Acad Sci U S A.. 99. 9733-9738 (2002)
[文献書誌] Yamano T, Murata S, Shimbara N, Tanaka N, Chiba T, Tanaka K, Yui K, Udono H.: "Two distinct pathways mediated by PA28 and hsp90 in major histocompatibility complex class I antigen processing"J Exp Med.. 196. 185-196 (2002)
[文献書誌] Murata S, Minami Y, Minami M, Chiba T, Tanaka K.: "CHIP is a chaperone-dependent E3 ligase that ubiquitylates unfolded protein"EMBO rep.. 2. 1133-1138 (2001)
[文献書誌] Tateishi K, Omata M, Tanaka K, Chiba T.: "The NEDD8 system is essential for cell cycle progression and morphogenetic pathway in mice"J.Cell Biol.. 155. 571-579 (2001)

2002 年度 実績報告書

ユビキチン様蛋白質修飾システムによる生体機能制御

研究代表者

千葉 智樹 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)

研究成果

[文献書誌] Tanahashi-Hori T., Tanahashi N., Tanaka K, Chiba T.: "Conditional knockdown of proteasomes results in cell-cycle arrest and enhanced expression of molecular chaperones Hsp70 and Hsp40 in chicken DT40 cells"J.Biol.Chem.. 278(in press). (2003)

[文献書誌] Yoshida Y, Chiba T, Tokunaga F, Kawasaki H, Iwai K, Suzuki T, Ito Y, Matsuoka K, Yoshida M, Tanaka K, Tai T.: "E3 ubiquitin ligase that recognizes sugar chains"Nature. 418. 438-442 (2002)

[文献書誌] Park KC, Kim JH, Choi EJ, Min SW, Rhee S, Baek SH, Chung SS, Bang O, Park D, Chiba T, Tanaka K, Chung CH: "Antagonistic regulation of myogenesis by two deubiquitinating enzymes, UBP45 and UBP69"Proc Natl Acad Sci U S A.. 99. 9733-9738 (2002)

[文献書誌] Yamano T, Murata S, Shimbara N, Tanaka N, Chiba T, Tanaka K, Yui K, Udono H.: "Two distinct pathways mediated by PA28 and hsp90 in major histocompatibility complex class I antigen processing"J Exp Med.. 196. 185-196 (2002)

[文献書誌] Murata S, Minami Y, Minami M, Chiba T, Tanaka K.: "CHIP is a chaperone-dependent E3 ligase that ubiquitylates unfolded protein"EMBO rep.. 2. 1133-1138 (2001)

[文献書誌] Tateishi K, Omata M, Tanaka K, Chiba T.: "The NEDD8 system is essential for cell cycle progression and morphogenetic pathway in mice"J.Cell Biol.. 155. 571-579 (2001)

2002 年度実績報告書

千葉智樹財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)