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本研究は、動物の脳におけるストレス認識制御機構を明らかにし、ストレス起因性の繁殖機能障害といった種々の問題に対する改善策を提供することを目的としている。本年度は、in vivo無麻酔下でブタの脳へアプローチすることを目的として、ブタ第三脳室への長期カテーテル留置法の確立を試みた。種々の実験器具や手術法を検討した結果、以下のように新たな手法を確立することができた。すなわち、本研究室で開発したブタ用脳定位固定装置を用いて、梅山豚(5-6ヶ月齢雌;50-55kg)の頭部を固定した。脳室内へ造影剤を投与することによる脳室造影法により第三脳室を可視化した。特注製のガイドカニューレ(外径1.3mm、内径0.9mm、長さ10cm)を第三脳室へ留置し、脳室液の逆流を確認した後、マイクロカテーテルを挿入した。ガイドカニューレを除去した後、マイクロカテーテルだけをデンタルセメントを用いて金属製プロテクターとともに固定した。脳室内への物質投与や血液の採取を容易にするために、マイクロカテーテルの手元部は頭頂部皮下を通して後背部より露出させ、同時に頚静脈に留置したカテーテルの手元部も後背部より露出させた。一週間の術後回復期間の後、脳室内マイクロカテーテルを介して副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン(CRH)を投与し、血中コルチゾール濃度の変化を調べた。その結果、血中コルチゾール濃度がCRHにより有意に増加することが明らかとなり、本実験で留置されたマイクロカテーテルが第三脳室に留置されていることが確認され、さらにブタが生理的に正常な生体反応を示すことが明らかとなった。また、カテーテル留置手術を受けたブタは一ヶ月以上維持することが可能であったことから、本年度実施した一連の研究により、in vivo無麻酔下でブタの脳へアプローチすることが可能となった。
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