ヒト腫瘍におけるミトコンドリア呼吸鎖複合体遺伝子の機能異常の検索と分子機構の解明

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14770080
• 研究機関: 岩手医科大学
• 研究代表者: 幅野 渉 岩手医科大学, 医学部, 助手 (50332979)
• キーワード: 消化器癌 / ミトコンドリアDNA / 呼吸鎖複合体遺伝子 / 癌抑制遺伝子

研究概要

大腸癌52症例、胃癌59症例および培養細胞株7種を対象に、核内SDHD(複合体II)遺伝子の変異の検索を行い、下記の結果を得た。
1 SDHD遺伝子内(エクソン1〜4)の点突然変異はPCR-SSCP法を用いて検索した。変異はすべての症例、細胞株で検出されなかった。
2 SDHD遺伝子座(11q22-23)における遺伝子欠失(LOH)は、5種のマイクロサテライトマーカー(D11S5014、D11S5015、D11S5017、D11S1347、D11S1328)を用いて検索した。LOHは大腸癌47症例中12例(26%)、胃癌52症例中9例(17%)で検出された。
3 SDHD遺伝子のmRNA発現量の変化はTaqMan法によるリアルタイムPCR解析により評価した。発現量の低下は、大腸癌19症例中15例(79%)で検出された。
4 上記の大腸癌19例を対象に、sodium bisulfite処理およびPCR直接シークエンス法を用いて、SDHD遺伝子の5'上流プロモータ領域のCpG配列におけるメチル化を検索した。メチル化はすべての症例で確認されなかった。
5 ミトコンドリアゲノム内の複合体遺伝子の変異は、本症例の大腸癌33例中7例、胃癌59例中5例で検出された。これらの変異とSDHD遺伝子の変異(LOH)は逆相関の関係があることがわかった。
6 以上の結果から、SDHD遺伝子が大腸癌や胃癌において癌抑制遺伝子様のはたらきをする可能性が示唆された。
本研究成果は第61回日本癌学会総会(平成14年)にて発表を行った。論文はOncology Reportsに掲載予定である。

研究成果

• [文献書誌] Habano W, Sugai T, Nakamura S et al.: "Reduced expression and loss of heterozygosity of the SDHD gene in colorectal and gastric cancers"Oncology Report. (in press). (2003)
• [文献書誌] Takahashi H, Sugai T, Habano W et al.: "Application of the crypt isolation technique to the assessment of genetic alterations of colorectal carcinomas"Pathology International. 52. 628-635 (2002)
• [文献書誌] Sugai T, Habano W, Uesugi N et al.: "Molecular validation of the modified Vienna classification of colorectal tumors"Journal of Molecular Diagnostics. 4. 191-200 (2002)
• [文献書誌] Suto T, Sugai T, Habano W et al.: "Allelotype analysis of the PTEN, Smad4 and DCC genes in biliary tract cancer"Anticancer Research. 22. 1529-1536 (2002)
• [文献書誌] Nakai K, Habano W, Fujita T et al.: "Highly multiplexed genotyping of coronary artery disease-associated SNPs using MALDI-TOF mass spectrometry"Human Mutation. 20. 133-138 (2002)