珪酸塩化合物により惹起されるヒト免疫異常の解析

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14770153
• 研究機関: 川崎医科大学
• 研究代表者: 高田 晶子 川崎医科大学, 医学部, 助手 (30278957)
• キーワード: 珪肺症 / 抗Fas自己抗体 / epitope mapping / ProteinChip analysis / apoptosis / 自己免疫 / 珪酸塩化合物

研究概要

産業医学の分野で、その原因がSiO_2を骨格に持つ珪酸塩化合物への曝露と考えられる自己免疫疾患を呈する症例群がある。特に、珪肺症における強皮症(SSc)やSLEなどの合併は有名であるが、その発症機序は明らかではない。これまでに我々は、珪肺症症例における自己抗体の高頻度の出現に着目し、アポトーシス関連因子に対する自己抗体の検出をWestern blottingにより行い、抗Fas自己抗体が自己免疫疾患の症状を伴わない珪肺症症例血清中に存在することを見出した。そこで本年度はこの結果をさらに確かめるために、抗原結合ProteinChipを用いて珪肺症症例血清中の抗Fas自己抗体の検出を行い、疾患対照としての自己免疫疾患であるSScおよびSLE症例の場合と比較検討した。Western blottingにより、SScおよびSLE症例においても抗Fas自己抗体が検出され、各症例の陽性率は珪肺症23.1%、SSc 46.7%、SLE 53.3%であった。各症例の陽性血清について、ProteinChip systemを用いて抗Fas自己抗体の検出を行ったところ、健常人に比べて高レベルの抗Fas自己抗体が検出され、これらの結果はWestern blottingでの結果と一致していた。また、Western blottingおよびProteinChip systemを用いた抗Fas自己抗体のlgサブクラスの解析では、主要なlgは珪肺症症例ではlgG1、SScおよびSLE症例ではlgG1あるいはlgG2、健常人ではlgMおよびlgAであると思われた。さらに、SPOTsメンブレンを用いた抗Fas自己抗体のepitope mappingでは、Fas分子上のepitopeは各人に複数存在し認識部位はほぼ共通していたが、珪肺症症例と同様にSScおよびSLE症例でも健常人に比べてepitopeが多数存在し、最大で9個のepitopeが確認された。細胞外領域におけるepitopeの中にはFas ligandとの結合に重要とされるアミノ酸を含んでいるものがあり、症例群はもちろん健常人にも確認された。一方、細胞内領域のepitopeはすべてdeath domainに存在し、健常人にはほとんどみられなかったことより、細胞外領域から細胞内領域へのintramolecular epitope spreadingの可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Otsuki T: "Dysregulation of Fas-mediated apoptotic pathway in silicosis patients"Recent Research Developments in Immunology. (In Press).
• [文献書誌] Otsuki T: "Secretory IgA in saliva and academic stress"Sci. Total Environ. (In Press).
• [文献書誌] Otsuki T: "Effects of all-trans retinoic acid (ATRA) on human myeloma cells"Leukemia & Lymphoma. (In Press).
• [文献書誌] Yata K: "Expression of angiogenic factors including VEGFs and the effects of hypoxia and thalidomide on human myeloma cells"Int. J. Oncol.. 22・1. 165-173 (2003)
• [文献書誌] Tomokuni A: "Detection of anti-topoisomerase I autoantibody in patients with silicosis"Environ. Health Prev. Med.. 7・1. 7-10 (2002)
• [文献書誌] Ueki A: "Intramolecular epitope spreading among anti-caspase-8 autoantibodies in patients with silicosis, systemic sclerosis and systemic lupus erythematosus, as well in healthy individuals"Clin. Exp. Immunol.. 129・3. 556-561 (2002)