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本研究は、日本人に見出されたRH式血液型システムにおける抗原を産生しない遺伝子(-D-)について、その原因を明らかにするためのものである。原因としては遺伝子の欠損、エクソン内の異常、ハイブリッド遺伝子形成、プロモーター領域の異常などが考えられ解析を行ってきた。昨年度の研究において、抗原決定に関わるエクソン1、2および5と、イントロン2、8に存在する多型領域についてそれぞれ遺伝子型を解析した結果、すべての箇所において原因遺伝子の存在が確認され、抗原を発現しない原因が大きな遺伝子欠損によるものではないことが明らかになった。また、エクソン内の異常については、すべてのエクソンについて多様な条件の下でPCR-SSCP分析を行ったが、塩基置換や部分欠失などの異常は検出されなかった。しかし、すべての塩基置換がSSCP法で検出されるとは限らず、シークエンス解析による確認が必要であると考えエクソンごとに解析を進めたが、現在までには検出されていない。RHCE遺伝子が、部分的にRHD遺伝子に置き換えられたハイブリッド遺伝子形成については、過去の事例よりイントロン2とイントロン7が組み換えのホットスポットと考えられlong PCRにより重点的にその領域を解析したが、組み換えは検出されていない。エクソン5の抗原決定部位において、RHCE遺伝子がヘテロで確認されておりRHD遺伝子に置き換わっていなかったこととあわせて考えても、ハイブリッド遺伝子形成の可能性は低いと考えられた。以上より、本遺伝子が抗原を発現しない原因としてプロモーター領域の異常が考えられ、さらなる解析が必要である。
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