| 研究概要 |
ホメオボックス遺伝子CDX1,2は,消化管発生の過程で上皮に肛門側の形質を与え,成体では腸管上皮のマーカーとなる.我々はCDX1,2が胃の腸上皮化生や胃癌の分化度・動態に影響を及ぼしているか否かについてin vivo, in vitroの両面から検討を加えた.
in vivoでは胃でのCDX1発現を検討した既報があり,まずCDX2に関して実験を開始した.胃癌の手術標本を抗CDX2抗体で免疫染色したところ,89%の腸上皮化生粘膜に異所性CDX2が発現していることがわかった.また胃癌組織では,64%の高分化型胃癌で異所性CDX2が発現しているのに対し,低分化型胃癌ではCDX2が発現していなかった.Ki-67染色で細胞増殖との相関を検討すると,CDX2が発現する胃癌の方が,発現していない胃癌に較べて,細胞増殖が乏しい傾向にあった.さらに予後との相関を検討すると,CDX2が発現した胃癌症例の方が,発現していない胃癌症例に較べて,切除術後に有意に良好な生命予後を示していた(5年生存率:87対33%).さらに我々は過去の実験から,高ガストリン血症マウスの胃粘膜はhypertrophicとなり,部分的にgoblet cell様細胞が腺管を形成することを見いだしている.そのため同マウス胃粘膜においてもCDX2の発現を免疫染色,in situ hybridyzationで検討し,ガストリンとCDX2の関連を検討した.しかしCDX2の発現は認められず,両者の関連は確認できなかった.
次にin vitroの解析を行った.CDX2の発現していないヒト低分化型胃癌細胞(MKN43等)にリポフェクション法によってCDX2を遺伝子導入して,一過性発現クローンを樹立した.同クローンからRNAを抽出し,cDNAライブラリーを作製した.非導入クローンからも同様にcDNAライブラリーを作製し,両者をDNAアレイ法で比較した.さらにCDX2の発現しているヒト高分化型胃癌細胞(AGS等)にanti-sense CDX2を遺伝子導入して,同様に非導入クローンとの比較解析を行った.現在,解析結果を検討中であり,いくつかの候補因子について,その機能を解析中である.
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