組み換えC蛋白で誘発した実験的多発筋炎の発症機構の解明と特異免疫療法の開発

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14770304
• 研究機関: (財)東京都医学研究機構
• 研究代表者: 神山 邦子 財団法人東京都医学研究機構, 東京都神経科学総合研究所, 研究員 (80301795)
• キーワード: 自己免疫性筋炎 / 筋炎惹起抗原 / T細胞レセプター / C蛋白 / DNAワクチン

研究概要

本研究の目的は、1)C蛋白誘発筋炎の発症機構をより詳細に分析すること、2)得られた結果に基づき特異的な免疫療法を開発することにある。このために以下の分析を行なった。まず、C蛋白(140KDa)の全長をカバーする4つの遺伝子組み換え蛋白を作製してラットに免疫し、最も筋炎惹起性の強いフラグメントがフラグメント2であることを同定した。さらに、フラグメント2をカバーするオーバーラッピング・ペプチドを用いて、C蛋白分子のT細胞、B細胞の反序部位を決定した。現在、これらのペプチドを用いて筋炎発症にT細胞、B細胞がどのように関与しているか分析中である。
自己免疫疾患発症に関与するT細胞レセプターやサイトカイン遺伝子を蛋白発現ベクターに組み込んで大腸菌で増幅後、精製してDNAワクチンを作製した。DNAワクチンをあらかじめ動物に投与して筋炎惹起性T細胞に対する抑制免疫を誘導し、筋炎の発症を抑制ことを試みた。現時点で顕著に疾患を抑制するDNAワクチンを見出していないが、次年度にはより広範囲に検索を行い、有効なワクチンの開発につとめる。これらの研究を通じて、これまで充分解明されていなかった多発性筋炎の発症機構を明らかにするとともに、免疫療法の基礎的な知見を得ることをめざす。

研究成果

• [文献書誌] 神山邦子, 宮越陽, 松本陽: "組み換えC-蛋白によって誘発した実験的多発筋炎の特性分析"神経免疫学. 10. 134-135 (2002)
• [文献書誌] Schneider, C, Matsumoto, Y, Kohyama, K, Toyka, KV, Hartung, HP, Gdd, R: "Experimental autoimmune myositis in the Lewis rat lack of spontaneous T-cell apoptosis and therapeutic response to glucocorticosteroid application"J Neuroimmunol.. 107. 83-87 (2000)
• [文献書誌] Kohyama, K., Matsumoto: "C-protein in the skeletal muscle induces severe autoimmune polymyositis in Lewis rats"J Neuroimmunol.. 98. 130-135 (1999)
• [文献書誌] Kim, G, Kohyama, K, Tanuma, N, Arimoto, H, Matsumoto, Y.: "Persistent expression of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE)-specific V 82 TCR spectratype in the central nervous system of rats with chronic relapsing EAE"J.Immunol.. 101. 6993-6998 (1998)
• [文献書誌] Kim, G, Kohyama, K, Tanuma, N, Matsumoto, Y.: "Diagnosis and assessment of preclinical and clinical autoimmune encephalomyelitis using peripheral blood lymphocyte TCR"Eur.J.Immunol.. 28. 2751-2759 (1998)
• [文献書誌] Kim, G, Tanuma, N, Kojima, T., Kohyama, K, Suzuki, Y., Kawazoe, Y., Matsumoto, Y: "CDR3 size spectratyping and sequencing of spectratype-derived TCR of spinal cord T cells in autoimmune encephalomyelitis"J.Immunol.. 161. 509-513 (1998)