肺サーファクタント蛋白質の生体防御機能の解明と臨床応用

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14770574
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 佐野 仁美 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (80295344)
• キーワード: 肺サーファクタント / 自然免疫 / 生体防御

研究概要

昨年度の研究成果をふまえて、本年度の研究目的は、(A)マクロファージによるウイルスや細菌の貧食を、SP-Aが促進させる機序の解明(B)SP-Aの臨床応用にむけて、精製SP-Aを大量発現させる系の確立、であった。
本年度の主な研究結果を以下にまとめる。
目的(A)に対する研究結果:
SP-Aは、肺炎球菌や黄色ブドウ球菌、ミコバクテリアの貧食を促進した。SP-Aの作用は、菌体との相互作用によるものではなく、マクロファージとの相互作用による。
SP-Aは、菌体の貧食に関わる受容体であるマンノース受容体やスカベンジャー受容体の、細胞表面の発現を増強した。その効果は短時間で、新たな蛋白合成を必要としない。すなわち、受容体の細胞質から細胞膜への局在変化が観察された。
SP-Aは、カゼインキナーゼを特異的に活性化した。SP-Aによる、肺炎球菌の貧食促進効果は、カゼインキナーゼ阻害剤で抑制された。
目的(B)に対する研究結果:
ヒトSP-AのcDNAをPEE14ベクターにクローニングし、CHO細胞にトランスフェクトして精製SP-Aを回収する系を確立した。最終的に、培養液1Lあたり、約700μgの精製SP-Aを得ることに成功した。

研究成果

• [文献書誌] Sato M, Sano H, Iwaki D, Kudo K, Konishi M, Takahashi H, Takahashi T, Imaizumi H, Asai Y, Kuroki Y.: "Direct binding of Toll-like receptor 2 to zymosan, and zymosan-induced NF-kB activation and TNF-a secretion are downregulated by lung collectin surfactant protein A."J Immunol. 171. 417-425 (2003)
• [文献書誌] Sano H, Nagai K, Tsutsumi H, Kuroki Y.: "Lactoferrin and surfactant protein A exhibit distinct binding specificity to F protein, and differently modulate repiratory syncytial virus infection."Eur J Immunol. 33. 2894-2902 (2003)
• [文献書誌] Kuronuma K, Sano H, Kuroki Y. et al.: "Pulmonary surfactant protein A augments the phagocytosis of Streptococcus pneumoniae by alveolar macrophages"J Biol Chem. (in press). (2004)
• [文献書誌] 黒木由夫, 佐野仁美: "肺コレクチンによる自然免疫生体防御-CD14, TLRとの相互作用を介する細胞応答制御-"医学のあゆみ. 205. 282-287 (2003)
• [文献書誌] 佐野仁美: "肺コレクチンの生体防御機構"生化学. 75. 285-288 (2003)
• [文献書誌] 佐野仁美, 黒木由夫: "肺サーファクタント蛋白質による自然免疫の分子機構"分子呼吸器病. 7. 220-224 (2003)