内耳遺伝子治療における免疫応答について

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14770885
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 石本 晋一 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (40292932)
• キーワード: 内耳 / 遺伝子治療 / アデノウイルス / レテロウイルス / 免疫応答

研究概要

本年度は昨年度ミシガン大学で行ってきた内耳遺伝子導入を当院の研究室で行えるよう実験機材の購入(手術道具、ポンプ他)及びreporter gene(GFP、lacZ)を組み込んだvirusを購入して内耳への遣伝子の組み込んだvirusがおこなうことが出来るように主にセットアップを行った。そして実際にモルモットを用いてreporter gene(GFP、lacZ)を組み込んだadenovirus及びretrovirusの導入を行いgene expressionが起こっていることを確認した。Virusは直接蝸牛の中央階に投与する方法と鼓室階に投与する方法でgene expressionの生じている部位を確認した。Adenovirusの投与ではgene expressionの起こる範囲は中央階投与では蝸牛内全体に起こった。また鼓室階投与では鼓室階のfibroblastにgene expressionが生じた。またRetrovirusでは中央階投与ではfibroblast及び血管条の細胞にgene expressionを認めた。また鼓室階投与ではわずかにfibroblastにgene expressionみとめた。免疫応答に関しての実験モデルはvirusを鼓室階に投与して検討している。はじめにgene expressionの起こっている期間を免疫抑制状態(サイクロフォスファマイド投与群)とコントロールで比較した。次に初回のvirus投与後3週間あけてvirusを2回投与行い免疫応答による細胞傷害をcytochochleogramで観察しているところである。さらに抗T cell抗体で免疫染色するために標本を作成している。

研究成果

• [文献書誌] Ishimoto S, et al.: "Use of Cartilage plate as Eardrums in Total Middle Ear Reconstructive surgery"Otol Neurotol. 24(1). 2-5 (2003)
• [文献書誌] Ishimoto S, et al.: "Induction of KGF, bFGF and TGF-α expression isreduced during hearing of tympanic meubrane perforction in the glucocorticoid-treated rat"Ann Otol Rhinol Laryugol. 947-953 (2002)
• [文献書誌] Ishimoto S, et al.: "Direct application of KGF, bFGF and TGFα during heo-liy of tympanic meubrane perforation in glucocorticoid treated rat"Acta Otol-Loryngologica. 122(5). 468-473 (2002)
• [文献書誌] Ishimoto S, et al.: "Vocal cord paralysis after surgery for thoracic aortic aneurysm"chest. 121(6). 1911-1915 (2002)
• [文献書誌] Ishimoto S, et al.: "Gene transfer into supporting cells of the organ of Corti"Hearing Research. 173. 187-197 (2002)
• [文献書誌] Ishimoto S, et al.: "Total middle ear reconstruction surgery for the radicalized ear"Otol-Neurotal. 23(3). 262-266 (2002)