加齢変化が嗅神経細胞の産生・維持機構に及ぼす影響についての基礎的研究

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14770886
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 近藤 健二 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (40334370)
• キーワード: 嗅神経細胞 / 老化 / 再生 / 免疫組織化学 / olfactory marker protein / BrdU

研究概要

対象と方法
生後10日、3ヶ月、16ヶ月のICRマウスに細胞増殖マーカーであるBrdUを投与し、投与後2時間、1日、2日、3日、5日、7日、14日、28日後に各群3〜5匹ずつ固定、鼻腔組織を摘出した。これを脱灰ののち包埋、冠状断で薄切した。切片を抗BrdU抗体および成熟嗅神経細胞の特異的マーカーである抗OMP抗体を用いて免疫2重染色し、BrdU陽性細胞の分布およびそのBrdU投与後の時間経過による変化、さらに同細胞がOMPと2重に陽性になるまでの時間経過を各年齢群で比較し、嗅神経細胞の前駆細胞の増殖能、およびこれが成熟嗅神経細胞に分化する速度を検討した。
結果と考察
10日齢群においてBrdU陽性細胞は次のような細胞動態を示した。まずBrdU投与後2時間ではBrdU陽性細胞は嗅上皮の基底部および最表層の支持細胞層に位置していた。投与後1〜3日目では個々のBrdU染色がやや薄く、または核内の小顆粒状になり、陽性細胞数はやや増加した。またBrdU陽性細胞の一部がやや表層に移動したが、明らかなOMPとの2重陽性を示す細胞は確認できなかった。5日目ではOMP染色性を示すBrdU陽性細胞が出現し、7日目ではこの2重陽性細胞の数が増加した。14日目ではほとんど全てのBrdU陽性細胞がOMP陽性となったが、BrdU陽性細胞の総数は7日目に比べ大きく減少した。28日目はさらにBrdU陽性細胞数が減少していた。3ヶ月齢群、16ヶ月齢群においてはBrdU陽性細胞数が10日齢群に比べて大きく減少していたが、OMPとの2重陽性を示す細胞の出現過程については10日齢群とほぼ同様の所見であった。以上の結果よりBrdUを取り込んだ新生細胞がOMP陽性となるまでの時間経過は10日齢群と16ヶ月齢群で大きな差異は認められず、嗅神経への分化速度は加齢変化で大きな影響を受けていないことが推察される。

研究成果

• [文献書誌] Yamasoba T, Kondo K, Miyajima C, Suzuki M: "Changes in cell proliferation in rat and guinea pig cochlea after aminoglycoside-induced damage."Neurosci Lett. 347. 171-174 (2003)
• [文献書誌] Ishimoto S, Kondo K, Ito K, Oshima K: "Hoarseness after cardiac surgery : possible contribution of low temperature to the recurrent nerve paralysis."Laryngoscope. 113. 1088-1089 (2003)
• [文献書誌] Arakawa M, Shiozuka M, Nakayama Y, et al.: "Negamycin restores Dystrophin expression in skeletal and cardiac muscles of mdx mice."J Biochem. 134. 751-758 (2003)
• [文献書誌] Tsunoda K, Kondo K, Kaga K: "Cell proliferation in the transplanted autologous fascia into the human vocal fold."Laryngoscope. in press.
• [文献書誌] Ishimoto S, Ito K, Kondo K, Yamasoba T, Kaga K: "Does external auditory canal coordinate development of malleal manubrium in human?"Archiv Otolaryngol Head Neck Surg. in press.