網膜神経幹細胞をより効率良く網膜視細胞に分化誘導するために、Crxと同様に視細胞の運命決定に関与している可能性があるホメオボックス遺伝子Otx2について、機能解析を行った。発生期のOtx2の視細胞における発現パターンを解析したところ、Otx2の発現はCrxにやや先行し、部位的にはほぼ重複していることが示された。Otx2のホモ接合ノックアウトマウスは胎生致死のため、Crxプロモーター制御下にCrerecombinaseを発現させたトランスジェニックマウスと、Otx2のプロモーター領域と第1イントロンにloxP配列を挿入した遺伝子操作マウスをかけ合わせることにより、Otx2のコンディショナルノックアウトマウスを作成した。このコンディショナルノックアウトマウスは、生存および繁殖可能であった。網膜における表現形を解析したところ、生後9日においても視細胞の発生はみられず、アマクリン細胞の増加がみられた。生後1ヶ月では著明な網膜の変性と萎縮がみられた。続いて、レトロウイルスベクターを用いてOtx2を生後0日の網膜にトランスフェクションし、強制発現実験を行った。Lineage analysisの結果、ウィルスベクターが感染した細胞のほとんどは視細胞に分化していることが示された。これらの結果より、Otx2は網膜前駆細胞を視細胞へと分化誘導する作用を持ち、単独あるいはCrxと共に網膜神経幹細胞に導入することで効率良く視細胞への分化を誘導できる可能性があると考えられた。
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