| 研究概要 |
心内膜炎の病巣から分離され、クローン化されたStreptococcus intermedius GAI-1157株を用い、菌体表層タンパク質抗原であるantigen I/IIをdegenerate PCR法で検討した。口腔連鎖球菌間で保存度の高い領域に縮重プライマーを設定しPCRを行い、塩基配列を決定した。その結果、この断片がantigen I/II塩基配列と相同性を示した。次にこの遺伝子の全長にわたる遺伝子配列構報を得るために、gene-walking法を用い、周辺域6.1kbの塩基配列を決定し、DDBJ/EMBL/GenBankデータベースに登録した(アクセッション番号AB045140)。S.intermedius のantigenI/II (Pas)は1310アミノ酸からなると予想され、antigen I/IIに保存される反復領域A領域とP領域は単純化され、繰り返し単位が1つであることがわかった。Streptococcus mutans PAcと70%のアミノ酸一致率を示した。
ラットとマウスを用いて心内膜から内皮細胞を分散し、初代培養を試みた。内皮細胞の同定にvon Willebrand抗体を用いた。現在、細胞の増殖が悪く、培養条件を検討中である。
Toll-like receptor 2,3,4のmRNAの発現を検討するために、ラット末梢血白血球より抽出したmRNAをRT-PCRに用いた。その結果、わずかにtlr3の発現が認められた。
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