突然変異誘発による口唇口蓋裂モデルマウスの作製と遺伝子解析

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14771133
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 山田 朋弘 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (60335619)
• キーワード: ENU / 突然変異 / 口唇口蓋裂 / マウス

研究概要

本研究では口唇口蓋裂(CL/P)関連遺伝子の突然変異による遺伝的因子の解明を目的としたモデルマウスの作製を行った。自然発生突然変異の多くは点突然変異であり、遺伝子異常の多くは父親由来、すなわち精子ゲノムの変異に由来する。ENUは強力な化学変異原で、塩基置換による点突然変異を誘発することで知られていることから、雄マウスにENUを投与することで精原細胞のゲノム上に点突然変異をランダムに発生させ、3世代にわたり表現型のスクリーニングを行い、CL/Pの発生率を検討した。
10週令のICR系、A/J系雄マウスにENU250mg/kgを腹腔内投与し、それぞれの同系雌マウスと交配を行った。第一世代(G0)で観察できる表現型は優性変異、G1とG2を戻し交配させてできた第三世代(G3)で観察できる表現型は劣性変異と考えられる。
その結果、ICR系ではG1およびG3世代で口蓋裂(CPO)発生率が増加した。また、G3世代の方が有意に発生率が高かった。口唇裂(CL)および唇顎口蓋裂(CLP)は認められなかった。A/J系では、G1およびG3とも同程度にCL/P発生率が増加していたが、G3ではCPOの割合が増加していた。
ENUはランダムに変異を誘発することから、CPOの方がより多くの遺伝子が関与していることが示唆された。また、系により発生率や裂型の差が認められたことは多因子疾患であるCL/Pの特徴を反映しており、疾患モデルとして有用であると考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Yamada, T., Fujiwara, K., Mishima, K., Sugahara, T.: "Effect of ENU (ethylnitrosourea) mutagenesis in cleft lip and/or palate pathogenesis in mice"International Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. (in press). (2004)
• [文献書誌] Yamada, T., Mishima, K., Mori, Y., Fujiwara, K., Sugahara, T.: "Three-dimensional anthropometry of the lips in young Japanese adults"Asian Journal of Oral and Maxilofacial Surgery. 16. 15-20 (2004)
• [文献書誌] Yamada, T., Mori, Y., Mishima, K., Sugahara, T.: "Nasolabial and alveolar morphology after presurgical orthopedic treatment in complete unilateral cleft lip and palate infants"Cranio-Maxillofacial Surgery. 31. 343-347 (2003)
• [文献書誌] 藤原久美子, 三島克章, 山田朋弘, 他: "両側性口唇・口蓋裂患者の顎裂及び口蓋残孔に対する治療計画について"岡山大学歯学雑誌. 22. 189-194 (2003)