口腔内常在細菌における口臭原因物質産生のメカニズムの解明

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14771185
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 吉田 康夫 九州大学, 歯学研究院, 助手 (10315096)
• キーワード: 口臭 / レンサ球菌 / 硫化水素 / 溶血

研究概要

申請者は口腔内常在細菌の中でも優勢を占める連鎖球菌に着眼し、数種類の連鎖球菌(S.anginosus、S.salivalius、S.oralis、S.gordonii、S.mutansおよびS.sobrinus)の粗酵素抽出物中に硫化水素産生能が存在することが明らかにした。この結果は、口臭の原因を考慮する上で口腔内の連鎖球菌が無視できない存在であることを意味する。さらに、S.anginosusは他の連鎖球菌と比較して、顕著に高い硫化水素産生能を有し、歯周病原因細菌に匹敵するほどの硫化水素を産生した。
この所見を詳細に解析するために、それぞれの菌種から硫化水素産生酵素を単離精製し、その酵素学的性質について比較検討した。硫化水素産生酵素は元来methionine合成経路のcytathionine β-lyaseとして働き、homocysteineを産生することが知られている。そこで、それぞれの精製酵素の基質としてcystathionineを使用すると、その分解能は大きな差異はなかった。一方、cysteineを基質として硫化水素産生能を比較したところ、S.anginosusの精製酵素のみが高い硫化水素産生能を有することが明らかとなった。この結果から、粗酵素における硫化水素産生能の違いは、酵素の性質に由来することが明らかとなった。
続いて、S.anginosusの硫化水素産生酵素によって産生される硫化水素の病原性を羊赤血球を用いて検討した。同酵素が産生する硫化水素は、赤血球中のhemoglobinをmethemoglobin、sulfhemoglobinなどの酸化hemoglobinに修飾し、赤血球内に酸化hemoglobinが蓄積した後に溶血を起こすことが明らかとなった。この結果は、高い硫化水素産生能を持つ細菌が口臭の原因としてのみ重要ではなく、病原性細菌として考慮すべきであることを示唆している。

研究成果

• [文献書誌] Y.Yoshida, Y.Nakano, A.Amano, M.Yoshimura, H.Fukamachi et al.: "lcd from Streptococcus anginosus encodes a C-S lyase with α,β-elimination activity that degrades L-cysteine"Microbiology. 148. 3961-3970 (2002)
• [文献書誌] A.Amano, Y.Yoshida, T.Oho, T.Koga: "Monitoring ammonia to access halitosis"Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod.. 94. 692-696 (2002)
• [文献書誌] Y.Yoshida, M.Negishi, A.Amano, T.Oho, Y.Nakano: "Differences in the βC-S lyase activities of viridans group streptococii"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 300. 55-60 (2003)
• [文献書誌] N.Suzuki, Y.Nakano, Y.Yoshida, T.Nezu, Y.Terada et al.: "Guanosine diphosphate-4-keto-6-deoxy-D-mannose reductase in the pathway for the synthesis of GDP-6-deoxy-D-talose in Actinobacillus actinomycetemcomitans"Eur. J. Biochem. 269. 5963-5971 (2002)