2002 年度実績報告書

NMDAレセプターコンプレックス上の新しい調節部位の探索研究

研究課題

研究課題/領域番号	14771276
研究機関	金沢大学
研究代表者	倉本展行金沢大学, 薬学部, 助手 (60324092)
キーワード	NMDA / Receptor / Ca^<2+> / Fe^<2+> / Fe^<3+> / Mg^<2+> / Neuron / culture
研究概要	大脳皮質神経細胞を妊娠18日目のラット胎児脳から単離し、無血清培養液中で培養した。この培養細胞をCa^<2+>感受性蛍光指示薬であるfluo-3で前処理後、複数細胞の蛍光強度変化を共焦点レーザー顕微鏡で同時に観察した。その結果、培養細胞をNMDAに暴露したところ、MgCl_2非添加条件下で、多数の神経細胞において蛍光強度上昇が観察された。一方、NMDA受容体特異的アンタゴニストであるMK-801を前処置すると、NMDAによる蛍光強度増加は完全に抑制された。NMDA暴露継続中は、少なくとも30分以上は蛍光強度上昇が観察されたのに対して、高濃度KCl添加による蛍光強度上昇は、暴露継続中でも経時的に減弱された。FeCl_2の添加は、NMDA適用に伴う蛍光強度上昇を著明に抑制したが、高濃度KCl添加による蛍光強度上昇に対してはほとんど著明な影響を与えなかった。この遊離Fe^<2+>の抑制効果は、10〜200μMの濃度範囲内では添加するFeCl_2の濃度依存的に出現したが、FeCl_3の添加は200μMでもNMDAによる蛍光強度上昇に著変を与えなかった。以上の結果からNMDA受容体の活性化が細胞内遊離Ca^<2+>濃度の増加を引き起こすこと、および膜電位依存型Ca^<2+>チャネルでは速やかに脱感作が招来されるのに対して、NMDA受容体Ca^<2+>チャネルでは脱感作が誘発されにくいことが確認されたばかりでなく、NMDAによるCa^<2+>濃度上昇は遊離Fe^<2+>により選択的かつ可逆的に阻害されることが推察された。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Nobuyuki Kuramoto et al.: "Xenobiotic response element binding enriched in both nuclear and microsomal fractions of rat cerebellum"Journal of Neuro chemistry. (in press). (2003)
[文献書誌] Nobuyuki Kuramoto et al.: "Modulation of DNA binding of nuclear transcription factors with leucine-zipper motifs by particular endogenous polyamines in murine central and peripheral tissues"Brain Research. (in press). (2003)
[文献書誌] Nobuyuki Kuramoto et al.: "Existence of xenobiotic response element binding in Dictyostelium"Biochimica Et Biophysica Acta. 1578. 1-11 (2002)
[文献書誌] Noritaka Nakamichi et al.: "Blockade by ferrous iron of Ca2+ influx through N-methyl-D-aspartate receptor channels immature cultured rat cortical neurons"Journal of Neuro chemistry. 83. 1-11 (2002)
[文献書誌] Takao Hirai et al.: "Potentiation of nuclear activator protein-1 DNA binding following brief exposure to N-methyl-D-aspartate in immature cultured rat hippocampal neurons"Journal of Neuroscience Research. 67. 523-532 (2002)
[文献書誌] Noritaka Nakamichi et al.: "Dual mechanisms of Ca^<2+> increases elicited by N-methyl-D-aspartate in immature and mature cultured cortical neurons"Journal of Neuroscience Research. 67. 275-283 (2002)

2002 年度 実績報告書

NMDAレセプターコンプレックス上の新しい調節部位の探索研究

研究代表者

倉本 展行 金沢大学, 薬学部, 助手 (60324092)

研究成果

[文献書誌] Nobuyuki Kuramoto et al.: "Xenobiotic response element binding enriched in both nuclear and microsomal fractions of rat cerebellum"Journal of Neuro chemistry. (in press). (2003)

[文献書誌] Nobuyuki Kuramoto et al.: "Modulation of DNA binding of nuclear transcription factors with leucine-zipper motifs by particular endogenous polyamines in murine central and peripheral tissues"Brain Research. (in press). (2003)

[文献書誌] Nobuyuki Kuramoto et al.: "Existence of xenobiotic response element binding in Dictyostelium"Biochimica Et Biophysica Acta. 1578. 1-11 (2002)

[文献書誌] Noritaka Nakamichi et al.: "Blockade by ferrous iron of Ca2+ influx through N-methyl-D-aspartate receptor channels immature cultured rat cortical neurons"Journal of Neuro chemistry. 83. 1-11 (2002)

[文献書誌] Takao Hirai et al.: "Potentiation of nuclear activator protein-1 DNA binding following brief exposure to N-methyl-D-aspartate in immature cultured rat hippocampal neurons"Journal of Neuroscience Research. 67. 523-532 (2002)

[文献書誌] Noritaka Nakamichi et al.: "Dual mechanisms of Ca^<2+> increases elicited by N-methyl-D-aspartate in immature and mature cultured cortical neurons"Journal of Neuroscience Research. 67. 275-283 (2002)

2002 年度実績報告書

倉本展行金沢大学, 薬学部, 助手 (60324092)