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2014 年度 実績報告書

環境応答DNAと脂質膜小胞の融合による動的な細胞型分子ロボットの設計と構築

研究課題

研究課題/領域番号 14J10002
研究機関東京工業大学

研究代表者

森田 雅宗  東京工業大学, 大学院総合理工学研究科, 特別研究員(PD)

研究期間 (年度) 2014-04-25 – 2017-03-31
キーワード細胞サイズリポソーム / DNAコンピューティング / 分子ロボット
研究実績の概要

昨年度は,遠心型マイクロ流体デバイスによる分子ロボットのボディとなる均一サイズを有した細胞サイズの脂質二重膜小胞(リポソーム)の作製法の開発に成功した.具体的には,高重力下において液体が封入された微細ガラス管からの微小液滴生成が可能な遠心型マイクロ流体デバイスを用いた.デバイス内部には脂質が溶けた油層と水層が油水界面を形成している.遠心力により,ガラス管の先端からサイズの異なる2種類の油中水滴が形成される,このとき小さい油中水滴ほど通過しやすいという物理的特性を利用することで,直径10-20 μmの均一サイズのリポソームを作製することが出来た.この得られたリポソームに,膜たんぱく質の挿入,膜表面上でのドメイン形成,脂質二重膜の外層と内層の非対称構造,リポソーム内部でのタンパク質発現系を封入することに成功した.今後,この技術を応用して,細胞膜の様な高次の機能を有した新たな人工細胞型分子ロボットの構築が期待できる.
また,環境応答型分子ロボットの構築の為のDNA分子コンピューティング反応の開発に成功した.具体的には,UV光照射によりDNAの構造変化を誘起し,RNA転写システムを利用することでDNA入力からRNAを出力するシステムの開発に成功した.今後,光だけでなく,小分子(ATPなど)を認識するDNAアプタマーの使用へと拡張することで,環境応答が可能な分子ロボットの構築を目指す.また,当初の目的であった脂質膜上のドメイン形成制御機構の構築について,現在,DNAが脂質膜に吸着,ドメインを誘起する膜ダイナミクスを引き起こすことを確認しており,今後さらなる検討が必要だが,外部からの刺激に応答して,同様に膜面上でのドメイン構造形成制御システムの構築を目指す基礎が確立された.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

昨年度は,(1)マイクロ流体デバイスによる分子ロボットのボディの構築,(2)環境情報に応答してリポソーム膜上でのドメイン形成を制御するという2つの実験を計画していた.
当初の研究計画に対して,(1)では計画通り,細胞サイズの均一なリポソームの作製法を構築することが出来た.さらに,生体システムの高次機能を模倣したリポソームの作製にも成功し,企業との共同研究など本研究以外へ波及した期待以上の成果を見出すことが出来た.(2)については,計画達成までは至っていないが,外部刺激に応答して入力と出力が異なるシステムの開発に成功し,分子ロボットのボディとなるリポソーム内部へ封入することが出来る段階まで研究が進んでいる.さらに当初の目的であるDNAによる膜上のドメイン制御機構の開発に向けてデータが出始めてきている.
以上より,最終目的を達成するための研究進捗は順調であると考えている.

今後の研究の推進方策

今後の推進方策として,本年度は,昨年度から引き続きDNAによる膜上のドメイン制御システムを完成させる.昨年度に構築した基礎技術を統合することで,これを達成させる.さらに,作成したリポソームの膜非対称構造を利用して,膜の内部と外部とで異なる分子センサーを配置する.これにより,異なる外部刺激をトリガーとした反応を実装したリポソームを作製し,膜のドメイン形成ダイナミクスや膜の変形ダイナミクスを誘起する系へと発展させる.
以上から,本研究課題である外部情報を自律的にセンスすることで,膜の変形などの機能を自発的に生み出す人工細胞型分子ロボットの構築を目指す.

  • 研究成果

    (9件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 1件、 謝辞記載あり 3件) 学会発表 (5件) 産業財産権 (1件) (うち外国 1件)

  • [雑誌論文] Generation of Monodisperse Cell-Sized Microdroplets using a Centrifuge-Based Axisymmetric Co-Flowing Microfluidic Device2015

    • 著者名/発表者名
      H. Yamashita, M. Morita, H. Sugiura, K. Fujiwara, H. Onoe, M. Takinoue.
    • 雑誌名

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      巻: 119 ページ: 492-495

    • DOI

      doi:10.1016/j.jbiosc.2014.09.018

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Droplet Microfluidics による人工細胞モデルの構築2015

    • 著者名/発表者名
      森田雅宗, 杉浦晴香, 瀧ノ上正浩
    • 雑誌名

      日本流体力学会誌「ながれ」

      巻: 34 ページ: 11-14

    • 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] マイクロ流体工学をベースとした非平衡人工細胞の構築2014

    • 著者名/発表者名
      森田雅宗, 杉浦晴香, 瀧ノ上正浩
    • 雑誌名

      日本化学会生体機能関連化学部会ニュースレター

      巻: 28(4) ページ: 3-6

    • 謝辞記載あり
  • [学会発表] Synthesis of Monodisperse Micro-Droplets Controlled by Co-Flowing Liquid Streams in Glass-Capillary Based Microfluidic Device2015

    • 著者名/発表者名
      Masamune Morita, Masahiro Takinoue.
    • 学会等名
      Physics of Structural and Dynamical Hierarchy in Soft Matter
    • 発表場所
      東京大学生産技術研究所, 駒場,東京
    • 年月日
      2015-03-16 – 2015-03-18
  • [学会発表] 人工細胞間コミュニケーションのためのマルチコンパートメントベシクルの作製2015

    • 著者名/発表者名
      森田雅宗
    • 学会等名
      第五回Yet Another-Artificial Cells 研究会
    • 発表場所
      マホロバマインズ三浦,三浦,神奈川
    • 年月日
      2015-02-19 – 2015-02-20
  • [学会発表] The rapid synthesis of cell-sized liposomes by centrifuge-based microfluidic device2014

    • 著者名/発表者名
      M. Morita, H. Onoe, M. Yanagisawa, K. Fujiwara, H. Saito, M. Takinoue
    • 学会等名
      The 18th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (microTAS2014)
    • 発表場所
      Henry B. Gonzalez Convention Center, San Antonio, USA
    • 年月日
      2014-10-26 – 2014-10-30
  • [学会発表] 光応答DNAと細胞サイズリポソームの融合による人工細胞型分子ロボット2014

    • 著者名/発表者名
      Masamune Morita, Hao Li, Tomonori Shibata, Hirohide Saito, Masahiro Takinoue
    • 学会等名
      第52回日本生物物理学会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター,札幌,北海道
    • 年月日
      2014-09-25 – 2014-09-27
  • [学会発表] 遠心式マイクロ流体デバイスによる均一サイズ人工細胞モデル膜小胞の作製2014

    • 著者名/発表者名
      森田雅宗, 尾上弘晃, 柳澤実穂, 藤原慶, 齊藤博英, 瀧ノ上正浩
    • 学会等名
      化学とマイクロ・ナノシステム学会 第29回研究会
    • 発表場所
      日本女子大学目白キャンパス,目白,東京
    • 年月日
      2014-05-22 – 2014-05-23
  • [産業財産権] 液滴製造デバイス、液滴の製造方法、リポソームの製造方法、固定具及び液滴製造キット2015

    • 発明者名
      瀧ノ上正浩, 森田雅宗, 山下仁義
    • 権利者名
      瀧ノ上正浩, 森田雅宗, 山下仁義
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      特願2014-48037
    • 出願年月日
      2015-03-11
    • 外国

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公開日: 2016-06-01  

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