2003 年度実績報告書

サルモネラの食細胞内寄生性の分子機構

研究課題

研究課題/領域番号	15019017
研究機関	千葉大学
研究代表者	山本友子千葉大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (60110342)
研究分担者	高屋明子千葉大学, 大学院・薬学研究院, 助手 (80334217) 友安俊文千葉大学, 大学院・薬学研究院, 助教授 (20323404)
キーワード	サルモネラ / マクロファージ / アポトーシス / Lon / 細胞内寄生菌 / 病原性
研究概要	サルモネラ病原戦略分子機構の全面解明を目的として、感染後のマクロファージアポトーシス誘発に関して研究し、その制御機構を以卞のように明らかにした。サルモネラがマクロファージに貪食後に誘発する蛋白質Macrophage Induced Protein (MIP)メンバーであるATP依存型プロテアーゼLonのノックアウト変異株(Lon mutant)は、マクロファージ内増殖能、を失い、マウスに弱毒化している。マクロファージ培養細胞RAW264.7に野生株あるいはLon mutantを感染させた後に、TUNEL染色後の共焦点顕微鏡観察、ELISAによるヒストン量の定量、AnnexinV標識後のフローサイトメーター解析により、マクロファージのアポトーシス誘導を検討したところ、Lon mutant感染細胞において高頻度にアポトーシスが誘発されていることが明らかとなった。さらにLon mutantによるアポトーシス誘導には、Caspase-1、Caspase-3が関与していることが明らかとなった。Lon mutantの高頻度アポトーシス誘導は、上皮細胞侵入に関わるSalmonella Pathogenicity Island (SPI)の高発現に起因することを明らかにした。LonによるSPI1発現制御機構を検討したところ、LonはSPI1レギュロンの最上位に位置する制御因子HilC,HilDのターンオーバーを介してレギュロン全体の負の制御因子として機能していることが明らかとなった。サルモネラはマクロファージに貪食されると直ちにSPI1の発現を低下させ自らの住処が過剰なアポトーシスに陥るのを防いでいるが、Lon mutantでは正常な抑制機構が働かずSPI1を連続的に発現させ、過剰なアポトーシズの誘導を引き起こした。このマクロファージアポトーシスの過剰誘導は、Lon mutantの弱毒化の一因であると考えることができる。サルモネラは、感染宿主のマクロファージ内で増殖後、適切な時期にマクロファージにアポトーシスを誘導して感染を拡大すると考えられるが、LonはSPI1発現とアポトーシスを制御することにより、サルモネラ病原戦略上、重要な役割を果たしていると言える。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Takaya, A., Tomoyasu, T., Mtasui, H., Yamamoto T.: "The DnaK-DnaJ chaperone machinery of Salmonella enterica serovar Typhimurium is essential for invasion of epithelial cells and survival in macrophages, leading to systemic infection."Infection and Immunity. 72. 1364-1373 (2004)
[文献書誌] Takaya, A., Suzuki, M., Matsui, H., Tomoyasu, T.Sashinami, R., Nakane, A., Yamamoto T.: "Lon, a stress induced ATP-dependent protease is critically important for the systemic salmonella infection of mice."Infection and Immunity. 71. 690-696 (2003)
[文献書誌] Matsui, H., Suzuki, M., Isshiki, Y., Kodama, C., Eguchi, M., Kikuchi, Y.Motokawa, K., Takaya, A., Tomoyasu, T., Yamamoto, T.: "Oral immunization with ATP-dependent protease deficient mutants protects mice against subsequent oral challenge with virulent Salmonella enterica serovar Typhimurium."Infection and Immunity. 71. 30-39 (2003)
[文献書誌] Tomoyasu, T., Takaya, A., Sasaki, T., Nagase, T., Kikuno, R., Morioka, M, Yamamoto, T: "A new heat shock gene agsA, which encodes a small chaperone involyed in suppressing protein aggregation in Salmonella entrica servar Typhimurium."Journal of Bacteriology. 185. 6331-6339 (2003)
[文献書誌] Tomoyasu, T., Takaya, A., Isogai, E., Yamamoto T.: "Turnover of FlhD and FlhC, masterregulator proteins for Salmonella flagellum biogenesis, by the ATP dependent ClpXP protease."Molecular Microbiology. 48. 443-452 (2003)
[文献書誌] 山本友子: "薬科微生物学"丸善株式会社. 286 (2003)

2003 年度 実績報告書

サルモネラの食細胞内寄生性の分子機構

研究代表者

山本 友子 千葉大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (60110342)

研究成果

[文献書誌] Takaya, A., Tomoyasu, T., Mtasui, H., Yamamoto T.: "The DnaK-DnaJ chaperone machinery of Salmonella enterica serovar Typhimurium is essential for invasion of epithelial cells and survival in macrophages, leading to systemic infection."Infection and Immunity. 72. 1364-1373 (2004)

[文献書誌] Takaya, A., Suzuki, M., Matsui, H., Tomoyasu, T.Sashinami, R., Nakane, A., Yamamoto T.: "Lon, a stress induced ATP-dependent protease is critically important for the systemic salmonella infection of mice."Infection and Immunity. 71. 690-696 (2003)

[文献書誌] Tomoyasu, T., Takaya, A., Sasaki, T., Nagase, T., Kikuno, R., Morioka, M, Yamamoto, T: "A new heat shock gene agsA, which encodes a small chaperone involyed in suppressing protein aggregation in Salmonella entrica servar Typhimurium."Journal of Bacteriology. 185. 6331-6339 (2003)

[文献書誌] Tomoyasu, T., Takaya, A., Isogai, E., Yamamoto T.: "Turnover of FlhD and FlhC, masterregulator proteins for Salmonella flagellum biogenesis, by the ATP dependent ClpXP protease."Molecular Microbiology. 48. 443-452 (2003)

[文献書誌] 山本 友子: "薬科微生物学"丸善株式会社. 286 (2003)

2003 年度実績報告書

山本友子千葉大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (60110342)

[文献書誌] 山本友子: "薬科微生物学"丸善株式会社. 286 (2003)