HIV感染細胞を制御する細胞性免疫の解明とその賦活法の開発

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15019104
• 研究機関: 日本医科大学
• 研究代表者: 高橋 秀実 日本医科大学, 大学院・医学研究科, 教授 (40221361)
• キーワード: HIV / CTL / Apoptosis / Tetramer / Toll-like receptor / 樹状細胞 / Crosspresentation / Poly(I:C)

研究概要

1.活性化CTLのHIVペプチドによるアポトーシス誘導
HIV-1-V3(P18)特異的なCTLが、ウイルスの再刺激などにより増殖過程に入った状況下において、再びウイルス由来の抗原ペプチドの刺激を受けるとアポトーシスに陥ることを見いだした。そしてこのアポトーシスはtetramer H-2^d/P18によって誘発されることから、クラスI MHC分子に結合したペプチドがCTL上のT細胞レセプター(TCR)を介して入ったシグナルによって誘発されることが判明した。また、このCTLアポトーシスは、Cyclosporin Aによってブロックされることより、こうした薬剤群によるCTL破壊の回避の可能性を示した。
2.Poly(I:C)を介した樹状細胞活性化によるCTL誘導法の開発
CTL誘導の鍵を握ると想定される貪食能の強い未熟樹状細胞(iDc)にHIV-gp120を捕捉させた後、そのiDCをPoly(I:C)を用いToll-like receptor(TLR)3からの刺激を用いて成熟させマウスに接種したところ、gp120内のimmunodominant epitopeであるV3(P18)特異的なCTLが誘導されることを見いだした。この際、TLR4からのsignalをgp120捕捉iDCに加えても、全くCTLによる樹状細胞の傷害は認められなかった。また、gp120とpoly(I:C)を用いて免疫したCTL誘発マウスの血清中にはV3特異的なIgG2a抗体が、gp120とLPSで免疫したマウスからは全くCTLは認められず、V3特異的なIgG1抗体が検出された。さらにinfluenzaウイルスのHA蛋白とPoly(I:C)を用いてマウスを免疫した場合にも、HA-epitope特異的なCTLが誘発されることを確認した。以上より、Poly(I:C)によりTLR3からのsignalが入ったiDCは、局所のCTLの誘導・活性化を惹起する可能性があることを見いだした。

研究成果

• [文献書誌] Ichkawa, M., Sugita, M., Takahashi, M., Satomi, M., Takeshita, T., Araki, T., Takahashi, H.: "Brest milk macrophages spontaneously produce GM-CSF and differentiate into dendritic cells in the presence of exogenous IL-4 alone."Immunology. 108. 189-195 (2003)
• [文献書誌] Sakaue, G., Hiroi, T., Nakagawa, Y., Someya, K., Iwatani, K., Sawa, Y., Takahashi, H., et al.: "HIV Mucosal Vaccine : Nasal Immunization with gp160-Encapsulated Hemagglutinating Virus of Japan-Liposome Induces Antigen-Specific CTLs and Neutralizing Antibody Responses."J.Immunol.. 170. 495-502 (2003)
• [文献書誌] Takaku, S., Nakagawa, Y., Shimizu, M., Norose, Y., Maruyama, I., Takano, T., Kohara, M., Takahashi, H.: "Induction of hepatic injury by hepatitic C virus-specific CD8^+ murine cytotoxic T lymphocytes in transgenic mice expressing the viral structural genes"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 301. 330-337 (2003)
• [文献書誌] Shinya, E., Hidaka, C., Owaki, A., Shimizu, M., Li, Y., Watanabe, K., Watari, E., Hayami, M., Takahashi, H.: "Effect of Net-deleted pseudotyeped HIV virions bearing an enhanced green fluorescent protein gene in the env on HIV-sensitive transformed T cells."Biomed.Res.. 24. 59-69 (2003)
• [文献書誌] Hidemi Takahashi: "Antigen presentation in vaccine development."Comp.Immunol.Microbiol. & Infect.Dis.. 26. 309-328 (2003)
• [文献書誌] Akahata, W., Ido, E., Akiyama, H., Uesaka, H., Enose, Y., Horiuchi, R., Kuwata, T., Takahashi, H., et al.: "DNA vaccination of macaques by a full-genome simian/human immunodeficiency virus type 1 plasmid chimera that produces non-infectious virus particles."J.Gen.Virol.. 84. 2237-2244 (2003)
• [文献書誌] Takeuchi, J., Watari, E., Shinya, E., Norose, Y., Matsumoto, M., Seya, T., Sugita, M., Kawana, S., Takahashi, H.: "Down-regulation of Toll-like receptor expression in monocyte-derived Langerhans cell-like cells : implications of low-responsiveness to bacterial components in the epidermal Langerhans cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 306. 674-679 (2003)
• [文献書誌] Kim, Y., Nakagawa, Y., Sugiyama, H., Shimizu, M., Takeshita, T., Araki, T., Takahashi, H.: "Induction of CD4^+ murine natural killer T-like cells by immunization with syngeneic thymoma expressing embryonic α-fetoprotein."Cell.Immunol.. 226. 1-10 (2003)
• [文献書誌] Narazaki, H., Watari, E., Shimizu, M., Owaki, A., Das, H., Fukunaga, Y., Takahashi, H., et al.: "Perfolin-dependent killing of tumor cells by Vγ1Vδ1-bering T cells."Immunol.Lett.. 86. 113-119 (2003)
• [文献書誌] Fujimoto, C., Nakagawa, Y., Ohara, K., Takahashi, H.: "Polyriboinosinic polyribocytidylic acid (Poly(I:C))/TLR3 signaling allows class processing of exogenous protein and induction of HIV-specific CD8^+ CTLs."Int.Immunol.. 16. 55-63 (2004)
• [文献書誌] Yanagihara, T., Kumagai, Y., Norose, Y., Moro, I., Nanno, N., Murakami, M., Takahashi, H.: "Age dependent decrease of polymeric Ig receptor expression and IgA elevation in ddY mice : a possible cause of IgA nephropathy."Lab.Invest.. 84. 63-70 (2004)
• [文献書誌] Ishii, R., Shimizu, M., Nakagawa, Y., Shimizu, K., Tanaka, S., Takahashi, H.: "In vivo priming of natural killer T cells by dendritic cells pulsed with hepatoma-derived acid-eluted substance."Cancer Immunol.Immunother.. 53(In press). (2004)
• [文献書誌] 高橋秀実(監修): "ブラック微生物学"丸善出版. 866 (2003)
• [文献書誌] 高橋秀実(分担): "分子生物学・免疫学キーワード辞典"医学書院. 1035 (2003)